[发明专利]利用磁珠纯化提高双特异性抗体的纯度的方法在审
| 申请号： | 201910525890.0 | 申请日： | 2019-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN110272496A | 公开（公告）日： | 2019-09-24 |
| 发明（设计）人： | 郁博文;刘科梅;徐珊珊;王芳;陈俏梅;王卓智;李竞;顾继杰;陈智胜 | 申请（专利权）人： | 上海药明生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/46 | 分类号： | C07K16/46;C07K1/14 |
| 代理公司： | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人： | 郑权 |
| 地址： | 200131 上海市浦东新区自由*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开一种利用磁珠纯化提高双特异性抗体的纯度的方法，包括步骤：将经活化的Protein A包被磁珠与待纯化的含双特异性抗体的上清液混合，孵育，待磁珠与双特异性抗体充分结合后，通过磁分离去除上清；先用平衡缓冲液清洗磁珠，清洗2～5次；再用水清洗磁珠；将得到的清洗后的磁珠用洗脱液进行洗脱，磁分离并收集洗脱液；分离后的磁珠再用洗脱液进行洗脱1～3次，合并洗脱液，得纯化后的双特异性抗体。本发明的方法无需澄清操作，节省了时间，并减少了设备需求，可以在较短的时间内完成更高通量、更大体积样品的双特异性抗体的纯化。 | ||
| 搜索关键词： | 双特异性抗体 磁珠 洗脱液 清洗 磁珠纯化 磁分离 洗脱 大体积样品 平衡缓冲液 设备需求 用水清洗 高通量 上清液 包被 孵育 活化 去除 澄清 合并 | ||
【主权项】：
1.一种利用磁珠纯化提高双特异性抗体的纯度的方法，其特征在于，包括步骤：(1)结合：将经活化的Protein A包被磁珠与待纯化的含双特异性抗体的上清液混合，孵育，待磁珠与双特异性抗体充分结合后，通过磁分离去除上清，得到结合后的磁珠；(2)清洗：先用平衡缓冲液清洗步骤(1)得到的磁珠，所述平衡缓冲液为0.05～0.5M Tris缓冲液，pH 6.7～7.3，清洗2～5次；再用水清洗磁珠；(3)洗脱：将步骤(2)得到的清洗后的磁珠用洗脱液进行洗脱，所述洗脱液为0.05～0.5M甘氨酸溶液，pH 2.5～3.5，磁分离并收集洗脱液；分离后的磁珠再用洗脱液进行洗脱1～3次，合并洗脱液，得纯化后的双特异性抗体。
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