[发明专利]用于上调人DLK1-DIO3印记域非编码RNA表达的sgRNA、重组质粒和细胞株有效
| 申请号： | 201910496685.6 | 申请日： | 2019-06-10 |
| 公开（公告）号： | CN110305863B | 公开（公告）日： | 2020-12-08 |
| 发明（设计）人： | 徐鑫;郑祥义;王潇;陈世明;李江枫;颜华卿 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/63;C12N5/10;C12R1/91 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林超 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于上调人DLK1‑DIO3印记域非编码RNA表达的sgRNA、重组质粒和细胞株。sgRNA序列如SEQ ID NO.1，具体为5’‑TTTATATGGAGGCGCAGAAG‑3’；方法合成为，合成sgRNA序列的核酸片段并插入到MS2‑P65‑HSF1表达质粒载体的多克隆位点并转化，选择单克隆菌株，提取MS2‑P65‑HSF1‑sgRNA‑DLK1‑DIO3重组质粒，将重组质粒转染到已预先转染dCAS9‑VP64质粒的目的细胞株，得到上调DLK1‑DIO3印记域非编码RNA表达的细胞株。本发明能快速、简便、准确上调细胞株中DLK1‑DIO3印记域上非编码RNA的表达。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 调人 dlk1 dio3 印记 编码 rna 表达 sgrna 重组 质粒 细胞株 | ||
【主权项】：
1.一种针对DLK1‑DIO3印记域启动子区设计的sgRNA序列，其特征在于：序列如SEQ ID NO.1，具体为5’‑TTTATATGGAGGCGCAGAAG‑3’，这一sgRNA命名为sgRNA(DLK1‑DIO3)。
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