[发明专利]一种用于研究UVB照射致早衰的原代黑素细胞培养方法有效
| 申请号： | 201910098258.2 | 申请日： | 2019-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN109735486B | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 高玲;闫娟;刘青杰;田梅;田雨汀;陆雪;李爽;蔡恬静 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 100088*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种用于研究UVB照射致早衰的原代黑素细胞培养方法，涉及放射生物学、细胞生物学技术领域。为了培养具有更高灵敏性的原代黑素细胞，本发明提供了下述方法：将包皮样本浸泡，剪去多余组织，将皮肤样本切成条状；转移到有盖器皿中，加入胰蛋白酶溶液在冰箱中孵育；分离真皮和表皮，将表皮转移到离心管中，室温下孵育、洗涤、离心；用黑素细胞培养基重悬沉淀，移至二氧化碳培养箱中继续后续培养。本发明方法较普通培养方法更加灵敏、适用性强，是用于不同剂量UVB照射原代黑素细胞实验研究的更优选择。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 研究 uvb 照射 早衰 原代黑素 细胞培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于研究UVB照射致早衰的原代黑素细胞培养方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)将皮肤样本在乙醇中浸泡，取出后去除样本上残留乙醇；(2)去除脂肪和皮下组织，将皮肤样本转移到有盖器皿中，加入胰蛋白酶溶液孵育过夜；(3)孵育后，弃去消化液，用PBS溶液清洗皮肤样本，弃废液；(4)分离皮肤真皮和表皮，将表皮置于PBS溶液中，室温下孵育30‑60min，获得细胞悬液；(5)将细胞悬液离心后弃去上清液，用PBS溶液洗涤沉淀；(6)然后用黑素细胞培养基重悬沉淀，获得的重悬液移至培养器皿，置于二氧化碳培养箱中培养48‑72h，获得原代黑素细胞；(7)继续培养并定期更换培养液；(8)传代后用于实验或冻存。
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