[发明专利]一种脂蛋白(a)的测定试剂盒

摘要

本发明提供了一种脂蛋白(a)的测定试剂盒，涉及医学生物检测技术领域。该试剂盒包括试剂R1、R2、校准品和质控品。试剂R1包括三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、聚乙二醇‑6000、生物防腐剂和表面活性剂；试剂R2包括三羟甲基氨基甲烷、羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒、二丁基甲基甲苯、甘氨酸、硫酸葡聚糖、生物防腐剂和表面活性剂。该试剂盒采用了胶乳免疫比浊法，使用混合粒径的胶乳试剂，可使用全自动生化分析仪同时对大量样本进行检测，线性好，提高了检测灵敏度、准确度、精密度，缩短了检测时间，操作简单，经济成本较低，且存储时间更长。

主权项

1.一种脂蛋白(a)的测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括：试剂R1、试剂R2、校准品和质控品；所述的试剂R1包括：三羟甲基氨基甲烷0.01mol/L、氯化钠9g/L、聚乙二醇‑6000 40g/L、生物防腐剂0.5g/L和表面活性剂1mL/L；所述的试剂R2包括：三羟甲基氨基甲烷0.01mol/L、羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒220mL/L、二丁基甲基甲苯1.3g/L、甘氨酸4g/L、硫酸葡聚糖8g/L、生物防腐剂0.5g/L和表面活性剂1mL/L；所述的生物防腐剂为NaN₃；所述的表面活性剂为曲拉通X‑100；所述的校准品包括：脂蛋白(a)、氯化钠9g/L、聚乙二醇‑6000 40g/L、硫酸葡聚糖8g/L、生物防腐剂0.5g/L和表面活性剂1mL/L；所述的质控品包括：脂蛋白(a)200mg/L、氯化钠9g/L、聚乙二醇‑6000 40g/L、硫酸葡聚糖8g/L、生物防腐剂0.5g/L和表面活性剂1mL/L；所述的羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒是羊抗人脂蛋白(a)抗体包被的聚甲基丙烯酸甲酯胶乳颗粒，羊抗人脂蛋白(a)抗体与聚甲基丙烯酸甲酯胶乳的体积比为1:2；所述的聚甲基丙烯酸甲酯胶乳是粒径为60‑100nm的聚甲基丙烯酸甲酯胶乳和粒径为100‑200nm的聚甲基丙烯酸甲酯胶乳混合而成，60‑100nm的聚甲基丙烯酸甲酯胶乳与粒径为100‑200nm的聚甲基丙烯酸甲酯胶乳的质量比为1:2；所述的羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒的制备方法，包括以下步骤：(1)制备羊抗人脂蛋白(a)抗体溶液：取羊抗人脂蛋白(a)抗体溶于Tris‑HCl缓冲液中，pH为7.2，制得浓度为1.0mL/mL的羊抗人脂蛋白(a)抗体溶液；(2)制备胶乳微球悬浮液：取聚甲基丙烯酸甲酯胶乳颗粒溶解于Tris‑HCl缓冲液中，浓度为1％(w/v)，加入聚天冬氨酸和N,N‑亚甲基双丙烯酰胺，孵育，离心，弃上清，用Tris‑HCl缓冲液洗涤胶乳微球两次，加入Tris‑HCl缓冲液，震荡重悬，制得浓度为1％(w/v)的胶乳微球悬浮液；(3)制备羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒：将步骤(1)得到的羊抗人脂蛋白(a)抗体溶液和步骤(2)得到的胶乳微球悬浮液混均，孵育，加入2‑羟基乙胺混匀，封闭，离心，弃上清，用Tris‑HCl缓冲液洗涤两次，加入Tris‑HCl缓冲液，震荡重悬，制得浓度为220mL/L的羊抗人脂蛋白(a)抗体胶乳颗粒。