[发明专利]一种用于中华鳖遗传性别鉴定的分子标记及方法有效
| 申请号： | 201910068488.4 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN109680076B | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 梁宏伟;邹桂伟;王利华;沙航;孟彦 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 11401 北京金智普华知识产权代理有限公司 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于水产生物技术领域，公开了一种用于中华鳖遗传性别鉴定的分子标记及方法，采用RAD技术对中华鳖雌雄个体进行测序，筛选雌雄特异性片段；根据雌雄特异性片段进行雌性基因组Walking，获得6532bp的特异性片段SEQ ID NO：1；基于特异性片段设计引物，进行引物筛选和验证获得特异性引物；采集中华鳖裙边组织，提取中华鳖基因组DNA，利用引物对在中华鳖个体中进行扩增；扩增结果进行电泳检测；进行遗传性别的鉴定。本发明解决了目前尚未见到中华鳖性别特异性标记用于遗传性别的鉴定，具有原创性。本发明准确鉴定成功率达到100％。 | ||
| 搜索关键词： | 中华鳖 特异性片段 分子标记 遗传性别 遗传性 扩增 生物技术领域 特异性标记 特异性引物 中华鳖裙边 基因组DNA 雌雄个体 电泳检测 设计引物 引物筛选 基因组 测序 引物 成功率 验证 采集 筛选 水产 | ||
【主权项】：
1.一种用于中华鳖遗传性别鉴定方法，其特征在于，所述用于中华鳖遗传性别鉴定方法包括：/n采用RAD技术对中华鳖雌雄个体进行测序，筛选雌雄特异性片段；/n根据雌性特异性片段进行雌性基因组Walking，获得6532bp的特异性片段SEQ ID NO：1；/n基于特异性片段设计引物，进行引物筛选和验证获得特异性引物组Female1F/Female1R和Female2F/Female2R；/n采集中华鳖裙边组织，保存在无水乙醇中；/n提取中华鳖基因组DNA，保存在超纯水中；/n利用引物组Female1F/Female1R和Female2F/Female2R在中华鳖个体中进行扩增；/n扩增结果进行电泳检测；/n进行遗传性别的鉴定；检测到特异性条带的为雌性中华鳖个体，未扩增出特异性条带的个体为雄性中华鳖；/n基于特异性片段设计引物中，引物包括：/n引物组1：/nFemale1F：TGACTGGCACTGGAGAAGGA；/nFemale1R：GCATCAACCACAGCCCTACA；/n引物组2：/nFemale2F：TCCAGGGCAGAAAGACACTC；/nFemale2R：ATGTCCCGGTGGATGGC。/n
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