[发明专利]一种基于两步PCR的高通量建库方法在审
| 申请号： | 201811478422.4 | 申请日： | 2018-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN109628440A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 李明;田溯宁;杨俊 | 申请（专利权）人： | 广州市达信智能科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 |
| 代理公司： | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人： | 文雯 |
| 地址： | 510600 广东省广州市南沙区丰*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种一种基于两步PCR的高通量建库方法，提高建库效率的建库方法。它包括PCR扩增、核酸外切酶选择消化和磁珠纯化。本发明简化了建库步骤，提高了建库效率。 | ||
| 搜索关键词： | 建库 高通量 核酸外切酶 磁珠纯化 消化 | ||
【主权项】：
1.一种基于两步PCR的高通量建库方法，其特征在于，包括如下步骤：第1步，提取DNA样本；第2步，将DNA样本在PCR扩增体系中，采用序列如SEQ ID NO.1‑2所示的特异性正向引物和特异性反向引物对其进行扩增，得到扩增产物；第3步，在第2步得到的扩增产物中加入核酸外切酶I进行酶切处理；第4步，在第3步得到的酶切产物中采用特异性引物和通用引物进行扩增处理，使扩增片断上带有接头，得到带接头的文库；第5步，对第4步得到的带接头折文库采用磁珠纯化，得到测序文库。
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