[发明专利]一种植物乳杆菌GS高酶活性发酵方法

摘要

本发明涉及生物菌种活性发酵技术，具体的讲是一种植物乳杆菌GS高酶活性发酵方法，1：将植物乳杆菌菌株接种在基础培养基中，活化的种子培养基；2：将活化的种子培养基分别接种在另一个基础培养基和发酵培养基中，得到发酵好的菌液；3：收集菌液，采用冷冻离心机进行离心，离心后菌泥进行乳化，并真空冷冻干燥，获得菌粉；4：取菌粉溶于去离子水中，重悬后，离心，重复两次，得到洗涤后的菌体；5：将洗涤后的菌体破菌、离心，取上清液，测定谷氨酰胺合成酶活性，本发明中酶活提升30%以上，同时极大的缩短了发酵时间。

主权项

1.一种植物乳杆菌GS高酶活性发酵方法，其特征在于：具体按如下步骤进行：步骤1：将‑80℃冷冻保藏的植物乳杆菌菌株接种在基础培养基中，并在37℃的温度下培养12h，得到活化的种子培养基；步骤2：将活化的种子培养基以2%~5%的接种量分别接种在另一个基础培养基和发酵培养基中，在37℃的温度下培养8~10h，得到发酵好的菌液；步骤3：收集菌液，采用冷冻离心机进行离心，离心条件为：温度4℃、转速7000r/min、时间10min，离心后菌泥和保护剂按照1：2的比例进行乳化，并真空冷冻干燥12h，冻干机的冷阱温度为‑80℃，获得菌粉；步骤4：取0.5g菌粉溶于50ml去离子水中，重悬后，转速7000r/min、时间5min，收集菌体，得到菌体A；将菌体A再用50ml去离子水重悬，转速7000r/min、离心5min，收集菌体，得到菌体B，再将菌体B用50ml去离子水重悬，转速7000r/min、离心5min，收集菌体，得到洗涤后的菌体；步骤5：将洗涤后的菌体用10ml磷酸二氢钠缓冲液重悬，在压力为1900bar的高压均质仪中破菌循环20次，之后在12000r/min的离心机中离心10min，取上清液，参考Spafio方法，使用solarbio公司GS酶活性测试试剂盒，测定上清液中谷氨酰胺合成酶活性。