[发明专利]抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA及其重组过表质粒以及LMH细胞系有效
申请号: | 201811118711.3 | 申请日: | 2018-09-26 |
公开(公告)号: | CN109161545B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 郁建锋;顾志良;王中亮;陈迟迟;张燕萍;邵芳;徐璐;胡悦 | 申请(专利权)人: | 常熟理工学院 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10;A61K31/7105;A61P1/16;A61P3/04 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 杨晓莉 |
地址: | 215500 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA,并公开了其重组过表质粒和具体应用,以及利用过表达miRNAs构建稳定低表达Sirt1基因的LMH细胞系。相对于现有技术,本发明以人工设计的miRNA对目的基因进行干扰,并通过简单的PCR技术直接快速的构建该miRNA的过表达载体,本发明所提供的pLNCX‑pmirG为miRNA进行过表达的一个很好的载体,并能依次进行逆转录病毒的包装,结合G418加压筛选和绿色荧光蛋白检测方法可以快速获得稳定过表达miRNA的细胞系,不仅可以为研究揭示Sirt1基因影响肝脏对营养状态的应答机制,也为研究人类、动物肝脏在能量代谢中的功能提供一个独特的肝细胞亚克隆系模型。 | ||
搜索关键词: | 抑制 sirt1 基因 表达 microrna 及其 重组 质粒 以及 lmh 细胞系 | ||
【主权项】:
1.一种抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA,命名为gSmiR30,其序列如SEQ ID NO:1所示。
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