[发明专利]抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA及其重组过表质粒以及LMH细胞系有效

专利信息
申请号: 201811118711.3 申请日: 2018-09-26
公开(公告)号: CN109161545B 公开(公告)日: 2021-07-27
发明(设计)人: 郁建锋;顾志良;王中亮;陈迟迟;张燕萍;邵芳;徐璐;胡悦 申请(专利权)人: 常熟理工学院
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10;A61K31/7105;A61P1/16;A61P3/04
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 杨晓莉
地址: 215500 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA,并公开了其重组过表质粒和具体应用,以及利用过表达miRNAs构建稳定低表达Sirt1基因的LMH细胞系。相对于现有技术,本发明以人工设计的miRNA对目的基因进行干扰,并通过简单的PCR技术直接快速的构建该miRNA的过表达载体,本发明所提供的pLNCX‑pmirG为miRNA进行过表达的一个很好的载体,并能依次进行逆转录病毒的包装,结合G418加压筛选和绿色荧光蛋白检测方法可以快速获得稳定过表达miRNA的细胞系,不仅可以为研究揭示Sirt1基因影响肝脏对营养状态的应答机制,也为研究人类、动物肝脏在能量代谢中的功能提供一个独特的肝细胞亚克隆系模型。
搜索关键词: 抑制 sirt1 基因 表达 microrna 及其 重组 质粒 以及 lmh 细胞系
【主权项】:
1.一种抑制鸡Sirt1基因表达的microRNA,命名为gSmiR30,其序列如SEQ ID NO:1所示。
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