[发明专利]一种神经细胞和肥大细胞共培养体系的构建及应用在审
申请号: | 201811008342.2 | 申请日: | 2018-08-31 |
公开(公告)号: | CN109055316A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 孙大力;夏珂;贺永胜;林岳瀛;戚宇星 | 申请(专利权)人: | 昆明医科大学第二附属医院 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N5/0787 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 650101*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种神经细胞和肥大细胞共培养体系的构建及应用。本发明构建了神经细胞和肥大细胞非接触共培养体系,包括如下步骤:从试验动物体内分离出神经细胞和肥大细胞并分别进行培养;培养后的肥大细胞进行甲苯胺蓝染色鉴定,培养后的神经细胞进行MAP2免疫荧光鉴定;将鉴定后的神经细胞和肥大细胞进行非接触共培养,建立神经细胞和肥大细胞共培养体系。该细胞共培养体系利于研究神经细胞的分泌物质对肥大细胞的形态功能等影响,该体系构建方便简单,容易实施。 | ||
搜索关键词: | 神经细胞 肥大细胞 培养体系 构建 非接触 甲苯胺蓝染色鉴定 生物技术领域 细胞共培养 免疫荧光 试验动物 体系构建 形态功能 分泌物 应用 体内 研究 | ||
【主权项】:
1.一种神经细胞和肥大细胞共培养体系的构建,其特征在于:包括以下步骤:步骤一、神经细胞及肥大细胞的获得和培养;步骤二、培养后细胞的鉴定;步骤三、鉴定后的神经细胞和肥大细胞非接触式共培养体系的构建;所述共培养体系的构建方法为:将神经细胞接种于培养板底部,5小时后用PBS缓冲液洗去未贴壁细胞,肥大细胞接种于孔径小于3.0μm的transwell上室,将transwell小室插入到培养神经细胞的培养板中,上室加入RPMI 1640培养基,下室加入nerobasal A基础培养基,构成神经细胞和肥大细胞非接触共培养体系。
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