[发明专利]一种鸭血红细胞SOD的分离纯化方法有效
| 申请号： | 201810987003.7 | 申请日： | 2018-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN109055325B | 公开（公告）日： | 2022-08-16 |
| 发明（设计）人： | 区炳庆;冼琼珍;卢卫红 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 王国标 |
| 地址： | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种鸭血红细胞SOD的分离纯化方法，包括步骤：采集新鲜鸭血，加入5‑8％的柠檬酸钠抗凝液，抗凝液与鸭血的体积比为1:5‑8，离心收集红细胞，洗涤，离心，加水搅拌1‑2h；加入重量比分别为4‑5％、0.2‑1％的氯化钠和硫酸铜，加压过滤，再将滤液用截留分子量为4000～6000D的中空纤维膜超滤浓缩；调节PH为5.5‑6.5，于55‑60℃水浴中加热30‑50min,冷却，离心，取上清液，加入预先用2.5mmol/L的磷酸缓冲液平衡的阴离子交换层析柱中，用4.5mmol/L的磷酸缓冲液洗脱，层析后收集得到SOD提取液，经真空冷冻干燥，得到SOD粉。通过多级纯化，大大提高产品纯度及蛋白含量，提取效率高、成本低，适合工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 血红 细胞 sod 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种鸭血红细胞SOD的分离纯化方法,其特征在于，包括步骤：(S1)采集新鲜鸭血，加入5‑8％的柠檬酸钠抗凝液，抗凝液与鸭血的体积比为1:5‑8，离心收集红细胞；(S2)用生理盐水洗涤3次以上，每次洗涤后进行离心，然后加入红细胞体积2‑3倍的去离子水，搅拌1‑2h；(S3)加入重量比分别为4‑5％、0.2‑1％的氯化钠和硫酸铜，加压过滤，再将滤液用截留分子量为3000‑6000D的中空纤维膜超滤浓缩，得到SOD浓缩液；(S4)调节PH为5.5‑6.5，于55‑60℃水浴中加热30‑50min,冷却，离心，取上清液，过预先用2‑3mmol/L的磷酸缓冲液平衡的阴离子交换层析柱，用5‑10mmol/L的磷酸缓冲液洗脱，收集SOD洗脱液，经真空冷冻干燥，得到SOD粉。
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