[发明专利]一种枸杞炭疽病抗性评价方法在审
| 申请号： | 201810853921.0 | 申请日： | 2018-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN108949898A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 王翠平;陈建伟;徐美隆;乔改霞 | 申请（专利权）人： | 宁夏林业研究院股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/18 | 分类号： | C12Q1/18;C12R1/645 |
| 代理公司： | 广州市一新专利商标事务所有限公司 44220 | 代理人： | 张芳 |
| 地址： | 750004 宁夏回族*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通过室内离体鉴定法评价枸杞炭疽病抗性的方法，该方法步骤如下：1)叶片采集，2)炭疽病菌培养，3)孢子悬液制备，4)炭疽病菌接种，5)枸杞离体叶片接种后病情调查及统计，6)根据分级标准将枸杞材料的炭疽病抗性进行分级。本发明形成完善的炭疽病抗性评价体系，本方法可操作性强、准确性高，能够科学地评价不同枸杞品种/株系对枸杞炭疽病抗性等级，对枸杞种植和分子育种具有较高的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 炭疽病抗性 枸杞 炭疽病菌 接种 孢子悬液制备 病情调查 分级标准 分子育种 离体鉴定 离体叶片 评价体系 叶片采集 枸杞品种 分级 株系 室内 应用 种植 统计 | ||
【主权项】：
1.一种枸杞炭疽病抗性评价方法，其特征在于，包括如下步骤：1)叶片采集：采集生长部位相当、大小基本一致且无病虫的枸杞叶片；2)炭疽病菌培养：将保存的枸杞炭疽病菌株，在超净工作台接种于PDA固体平板，该PDA固体平板包括马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂15克，并且加蒸馏水定容至1000毫升后高压蒸汽灭菌，于28±1℃培养；3)孢子悬液制备：将生长5‑7天的菌落划块接种于液体PDA培养基，该液体PDA培养基包括马铃薯200克，葡萄糖20克，并且加蒸馏水定容至1000毫升后高压蒸汽灭菌，震荡培养5‑7天，离心，计数，用灭菌蒸馏水稀释至所需浓度，具体为106个孢子/ml、107个孢子/ml、108个孢子/ml，得到孢子悬液，备用；4)炭疽病菌接种：将枸杞叶片进行表面消毒并清洗后，将叶片置于灭菌培养皿，用灭菌手术刀刀尖在叶片叶脉两侧划2mm伤口，伤口处分别接种10μL配置好的孢子悬液，并进行培养；5)枸杞离体叶片接种后病情调查及统计：于25℃、12h光照/12h黑暗、湿度80％条件培养4天后测量病斑直径，将直径大小作为衡量病害严重程度的评价指标；6)根据分级标准将枸杞材料的炭疽病抗性进行分级，分级标准如下：一级：病斑直径X：0≤X<1mm；二级：病斑直径X：1≤X<2mm；三级：病斑直径X：2≤X<3mm；四级：病斑直径X：3≤X<4mm。
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- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌陶瓷抗细菌性能的检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标曲建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的陶瓷抗细菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h后对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的陶瓷抗细菌性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标曲法，将以先进检测技术支撑产品质量提升和市场秩序规范。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测抗菌塑料防霉性能的方法-201910199713.8
- 李文杰;张小东;冯金艳;艾连峰;郝凌云 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌塑料防霉性能的检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的塑料防霉性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养48h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌塑料防霉性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测抗菌皮革防霉性能的方法-201910199714.2
- 李文杰;靳慧达;连素梅;洪伟;崔宗岩 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌皮革防霉性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的皮革防霉性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养48h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；同时提供结果评价依据。本发明研发的抗菌皮革防霉性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCA-lgIA标准曲线法检测抗菌陶瓷抗真菌性能的方法-201910199715.7
- 李文杰;刘晓慧;郭凤柳;洪伟;郝凌云 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌陶瓷抗真菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；美蓝染色后菌悬液活菌含量CB血球板计数；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液活菌CA标定；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IA测定及活菌ATP浓度CA和TA推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的陶瓷抗真菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h/48h后对照样品和抗菌样品，测定其IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的陶瓷抗真菌性检测的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，将以先进检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测抗菌橡胶防霉性能的方法-201910199716.1
- 李文杰;周波;贺鹏;孟祥振;郝凌云 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌橡胶防霉性能的检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标准曲线建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的橡胶防霉性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养48h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌橡胶防霉性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCA-lgIA标准曲线法检测抗菌塑料抗细菌性能的方法-201910199717.6
- 李文杰;刘晓慧;杨宇龙;郭凤柳;曹彦强 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种抗菌塑料抗细菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液的活菌ATP浓度CA标定；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IA测定及其活菌ATP浓度CA和TA推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的塑料抗细菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h后的对照样品和抗菌样品，测定回收液IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的抗菌塑料抗细菌性能检测的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，将以先进的检测技术支撑产品质量提升和市场秩序规范。
- ATP荧光lgCA-lgIA标曲法评价一次性卫生用品真菌杀灭效果的方法-201910199718.0
- 李文杰;靳慧达;娄巧哲;连素梅;崔宗岩 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种一次性卫生用品真菌杀灭效果评价方法，检测步骤包括：样品提取等要求；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；美蓝染色后菌悬液活菌含量CB血球板计数；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液活菌CA标定；中和剂鉴定及杀菌试验；回收液IA测定及CA推算；杀菌率R和灭菌指数A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的卫生用品真菌杀灭效果进行精准定量评价。本发明规定洗脱回收染菌不同时间后的对照样品和试验样品，测定回收液IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的一次性卫生用品真菌杀灭效果评价的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，可完善相关评价方法体系。
- ATP生物荧光lgCB-lgIB标准曲线法检测家用电器抗细菌性能的方法-201910199720.8
- 李文杰;艾连峰;钱云开;郝凌云;郭凤柳 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种家用电器抗细菌性能检测方法，检测步骤包括：样品制备及前处理；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；OD值‑活菌含量对数值lgCB标曲建立及接种菌液CB标定；lgCB‑相对荧光强度对数值lgIB标曲建立；样品接种、培养及洗脱回收；回收液IB测定及其活菌含量CB和TB推算；抗菌率R或抗菌活性值A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的家电抗细菌性能进行精准定量测试。本发明规定洗脱回收接触0h及培养24h后对照样品和抗菌样品，测定回收液IB并以lgIB表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的家用电器抗细菌性能检测的ATP生物荧光lgCB‑lgIB标准曲线法，将以科学先进的检测技术支撑产品质量提升。
- ATP生物荧光lgCA-lgIA标曲法评价液体消毒剂细菌杀灭效果的方法-201910199722.7
- 李文杰;崔宗岩;钱云开;闫冀焕;慈颖;宿雅彬 - 李文杰
- 2019-03-15 - 2019-09-24 - C12Q1/18
- 本发明涉及一种液体消毒剂细菌繁殖体杀灭效果评价方法，检测步骤包括：样品提取及最低有效浓度确定；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；ATP浓度对数值lgCA‑相对荧光强度对数值lgIA标曲建立及接种菌液活菌ATP浓度CA标定；中和剂鉴定及定量悬液试验；回收液IA测定及其活菌ATP浓度CA和TA推算；杀灭率R及灭菌指数A计算；结果判定；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的消毒剂细菌繁殖体杀灭效果进行精准定量评价。本发明规定回收作用不同时间后的试验样液和对照样液，测定其IA并以lgIA表征和计算R或A；提供结果判定依据。本发明研发的消毒剂细菌繁殖体杀灭效果评价的ATP生物荧光lgCA‑lgIA标曲法，可完善消毒效果评价方法体系。
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