[发明专利]一种快速检测稻谷中两种稻曲毒素的方法

摘要

本发明公开了一种快速检测稻谷中两种稻曲毒素的方法，包括如下步骤：选取粉碎稻谷样品，并将粉碎稻谷样品置于离心管中，加酸性水溶液高速匀浆提取后，高速离心处理，取上清液，残渣再加酸性水溶液高速匀浆均质提取，再次高速离心，合并上清液于浓缩瓶中，浓缩后，待净化，将处理后的上清液置于C18固相萃取柱内，依次用甲醇、超纯水活化，上清液用甲醇以及水混合溶液洗脱，浓缩近干，然后再次利用甲醇与甲酸水混合溶液定容，过滤膜，将净化后的稻谷样品进行超高效液相色谱串联质谱分析本发明的目的是提供一种简单、快速、经济、灵敏、安全。

主权项

1.一种快速检测稻谷中两种稻曲毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：标准样品溶液制备：选取稻曲毒素A以及稻曲毒素B，分别用超纯水将稻曲毒素A以及稻曲毒素B稀释为质量浓度为0.005mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L的标准溶液；S2：样品的提取：选取粉碎稻谷样品，并将粉碎稻谷样品置于离心管中，加酸性水溶液高速匀浆提取后，高速离心处理，取上清液，残渣再加酸性水溶液高速匀浆均质提取，再次高速离心，合并上清液于浓缩瓶中，浓缩后，待净化；S3：样品的净化：将S2中处理后的上清液置于C18固相萃取柱内，依次用甲醇、超纯水活化，上清液用甲醇以及水混合溶液洗脱，浓缩近干，然后再次利用甲醇与甲酸水混合溶液定容，过滤膜，完成后待测；S4：将S3中净化后的稻谷样品进行超高效液相色谱串联质谱分析，具体步骤如下；(1)、选取一支色谱柱，并向其中注入A、B混合流动相，且A相具体为水，所述水内含有甲酸，B相具体为色谱级甲醇，A、B混合流动相以梯度洗脱方式，按0.1‑0.4ml/min的流速进入色谱柱内，分析时间5分钟，能够保证目标物和杂质充分分离；(2)、上述完成后，再次对其置于三重四级杆式质谱仪内，以高能电子流轰击样本，使该样本失去电子变为带正电荷的分子离子和碎片离子，通过雾化器、干燥气以及碰撞气对分子离子进行质谱优化处理，且雾化器气流为1.5‑3L/min，干燥气气流为15‑20L/min，碰撞气为200‑230Kpa；S5：添加一定浓度标准溶液至粉碎的空白稻谷样品内，得到添加回收样品，将添加回收样品、待测样品均按照S2、S3以及S4对样本进行处理，以S1中配制的0.005mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L六个浓度为标准工作曲线，然后进行LC‑MSMS分析分别得到相应峰面积，将添加回收样品和待测样品峰面积带入标准工作曲线方程，计算稻曲毒素A以及稻曲毒素B的添加回收率和变异系数，并得到待测样品中的毒素含量，即完成稻谷中稻曲毒素的检测。