[发明专利]一种通过均质器高效胎盘间充质干细胞的制备方法在审
| 申请号： | 201810408205.1 | 申请日： | 2018-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN110373381A | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 陈蓓宁;邢为藩;张鹏 | 申请（专利权）人： | 陈蓓宁;邢为藩 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 江苏省南京市江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及胎盘来源的间充质干细胞的分离及其纯化，属于干细胞和组织工程领域。经产妇及其家属同意，得到其剖腹产后的胎盘，立即放入加有多种抗生素的储存液中短期保存。胎盘在实验室内反复清洗血水后进行粉碎，胶原酶消化的同时进行均质器的拍打，从而获得细胞悬液。通过密度梯度离心发获得胎盘间充质干细胞。通过使用均质器分离胎盘间充质干细胞的效率高传统方法数倍，降低酶解时间，提高成功率。所获得的间充质干细胞具有与骨髓来源的间充质干细胞类似的体外扩增能力和多向分化潜力，是组织工程和细胞治疗潜在的种子细胞来源，具有重要的临床意义。 | ||
| 搜索关键词： | 间充质干细胞 均质器 胎盘间充质干细胞 胎盘 密度梯度离心 种子细胞来源 组织工程领域 胶原酶消化 多向分化 反复清洗 分离胎盘 骨髓来源 临床意义 胎盘来源 体外扩增 细胞悬液 细胞治疗 组织工程 储存液 干细胞 剖腹产 潜在的 血水 放入 酶解 制备 成功率 抗生素 拍打 产妇 保存 | ||
【主权项】：
1.一种胎盘来源间充质干细胞的制备方法，其特征在于：应用均质器拍打同时酶消化的方法从清洗除菌的胎盘中分离间充质干细胞。通过使用均质器分离胎盘间充质干细胞的效率高传统方法数倍，降低酶解时间，提高成功率。所获得的间充质干细胞具有与骨髓及其它间充质干细胞相似的特征，有扩增培养和多向分化潜力。
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- 2019-06-11 - 2019-10-01 - C12N5/0775
- 本发明属于干细胞制备领域，尤其涉及一种脐带间充质干细胞的制备方法。本发明采用了一种脐带间充质干细胞的制备方法，即采用了组织块贴壁的方法制备脐带间充质干细胞，即将脐带清洗后，去除脐带动脉和静脉膜，用手术剪刀剪成小的组织块，再将组织块筛选清洗后，贴在培养皿底部，经37度烤干后，加入培养液，置于CO2培养箱中培养，12‑‑14天后消化、收集细胞。使用该方法成功收集了足量的脐带间充质干细胞。使用该方法成功收集了足量的脐带间充质干细胞，从而解决了现有的组织块法收获细胞效率低下的问题。
- 一种人骨髓间充质干细胞株的建立方法和诱导分化应用-201910565899.4
- 袁勇;王伟舟;郭皓;赵刚;郭立;赵泽玉;邱俊杰;杨康;姚向宇;贺天磊 - 昆明医科大学第二附属医院
- 2019-06-27 - 2019-09-27 - C12N5/0775
- 本发明公开了一种人骨髓间充质干细胞株的建立方法和诱导分化应用，本发明提取的股骨干髓腔来源的骨髓间充质干细胞纯度高、活性好，完全能够满足干细胞成骨诱导分化等一系列实验，提取的骨质疏松患者骨髓间充质干细胞与正常人的相比转录组学上存在表达差异，为进一步揭示骨髓间充质干细胞在骨质疏松症的发病机制和寻找新的治疗靶点，提供了新的思路和方法。同时，针对骨质疏松症等骨髓间充质干细胞含量较少的样本，本技术亦能有效增加提取后的细胞获得量，增加贴壁细胞数量，促进细胞更快进入对数生长期，减少培养时间，降低培养成本，更易于保持骨髓间充质干细胞的细胞干性，从而满足成骨分化、干细胞治疗等一系列实验需求。
- 一种人源脐带间充质干细胞的培养及冻存方法-201910612981.8
- 李哲浩 - 赛瑞诺（北京）生物科技有限公司
- 2019-07-09 - 2019-09-27 - C12N5/0775
- 本发明涉及一种人源脐带间充质干细胞的培养和冻存方法，所述培养方法包括先从脐带组织中分离培养原代种子细胞，然后将原代种子细胞进行扩大培养的步骤，本发明通过在原代种子细胞培养阶段，创造性的采用第二次原代贴壁培养的方法，大幅缩短了原代种子细胞分离培养时间，提高了原代种子细胞数量，提高了原代种子细胞纯度，为临床研究和应用提供了充足的标准化种子细胞和培养方法。本发明制备得到的人源脐带间充质干细胞，在体、内外均可以向成骨、成软骨、成脂分化。本发明所述冻存方法通过采用无血清冻存液冻存体系，保证了所冻存细胞无动物源成分，且不使细胞受损，复苏后细胞活性好。
- 一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的完全培养液及制备方法-201910648547.5
- 杨慧慧 - 杨慧慧
- 2019-07-18 - 2019-09-27 - C12N5/0775
- 本发明提供了一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的完全培养液及制备方法，本发明的一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的完全培养液是向1L无菌蒸馏水中，依次加入0.003~0.005g的氧化胆碱样品的制备、1~2g的氨基酸样品、10~12g的无机盐、0.003~0.005g的偏多酸钙、0.003~0.005g的叶酸、0.007~0.0075g的肌醇、0.003~0.005g的烟酰胺、0.003~0.005g的吡哆醇、0.0003~0.0005g的核黄素、0.003~0.005g的硫胺素、4~5g的葡萄糖样品和0.01~0.02g的酚红混合均匀即得一种诱导脂肪干细胞成软骨分化的完全培养液，本发明的诱导脂肪干细胞成软骨分化的完全培养液可以诱导脂肪干细胞快速的分化。
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