[发明专利]基于SPRM技术进行复用性单细胞蛋白质组学监测方法

摘要

一种基于SPRM技术进行复用性单细胞蛋白质组学监测方法，在第一定点捕捉芯片中的捕捉位点周围，以放射状点阵形式修饰不同蛋白质的特异性识别抗体；向微管路注入待检测细胞溶液，使其在单细胞捕捉位点处产生不同的SPR响应信号；筛选出3‑6种SPR响应信号强的待测细胞的分泌蛋白标志物；在第二定点捕捉芯片中的单细胞捕捉位点周围，以扇形结构修饰不同抗体，向微管路注入待检测细胞溶液；在第二定点捕捉芯片中的扇形结构的两侧分别修饰条码形不同蛋白质的特异性识别抗体；向微管路注入细胞裂解液，对比不同条码处的SPR响应信号的强弱，实现高灵敏度监测。本发明能够实现多种分泌蛋白质的原位、动态监测，提高蛋白质分子的吸附固定量及其检测灵敏度。

主权项

1.一种基于SPRM技术进行复用性单细胞蛋白质组学监测方法，是在特异性单细胞定点捕捉芯片实现，其特征在于，包括如下步骤：1)在第一特异性单细胞定点捕捉芯片中的单细胞捕捉位点周围，采用喷墨打印技术以放射状点阵形式修饰不同蛋白质的特异性识别抗体；2)打开控制阀，向微管路注入待检测细胞溶液，使待检测细胞在单细胞捕捉位点处分泌蛋白质分别与所述的不同蛋白质的特异性识别抗体结合，产生不同的SPR响应信号；3)分别对比不同点阵位置处的SPR响应信号的强弱，筛选出3‑6种SPR响应信号强的待测细胞的分泌蛋白标志物；4)根据筛选出的3‑6种待测细胞的分泌蛋白标志物，在第二特异性单细胞定点捕捉芯片中的单细胞捕捉位点周围，采用喷墨打印技术以扇形结构修饰不同抗体，增大单种蛋白质的特异性识别抗体结合面积，打开控制阀，向微管路注入待检测细胞溶液，用于实现多种分泌蛋白质的原位、动态监测；5)采用喷墨打印技术在第二特异性单细胞定点捕捉芯片中的扇形结构的两侧分别修饰条码形不同蛋白质的特异性识别抗体；6)打开控制阀，采用缓冲液冲洗待测细胞所在微管路的特定通道，然后向微管路注入细胞裂解液，调整微管路内的局限化往返液流，将细胞裂解后的蛋白质均匀分布并吸附固定在条码形不同蛋白质的特异性识别抗体的表面，对比不同条码处的SPR响应信号的强弱，实现细胞内部多种蛋白质的高灵敏度监测。