[发明专利]一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201810308428.0 | 申请日： | 2018-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN108546296A | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 王选年;冯春花;李鹏;孙国鹏;王利平;岳锋;朱艳平;张艳芳;张万方;武乐祎;任鹏举;王亚平;王玲玲 | 申请（专利权）人： | 新乡学院 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C07K16/06;C07K1/22 |
| 代理公司： | 新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 41139 | 代理人： | 路宽 |
| 地址： | 453003 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法，属于表位抗体的制备技术领域。本发明的技术方案要点为：根据筛选到的NDV病毒一条能够识别NDV抗体的多肽P25，再根据该多肽P25筛选出针对多肽P25的表位抗体，该多肽P25表位抗体能够与新城疫病毒发生特异性反应，缩短了制备NDV多肽P25表位抗体的过程。 | ||
| 搜索关键词： | 表位抗体 多肽 制备 鸡新城疫病毒 筛选 技术方案要点 制备技术领域 特异性反应 新城疫病毒 抗体 | ||
【主权项】：
1.一种能够识别鸡新城疫病毒的表位抗体的制备方法，其特征在于具体步骤为：（1）新城疫病毒高免血清的制备，将新城疫病毒接种于鸡成纤维细胞，72h后收获病毒，用蔗糖梯度离心的方法纯化新城疫病毒，以1mg/mL的浓度肌肉注射给2周龄的小鸡，当出现临床症状时采集血清，用多肽P25通过ELISA方法检测抗体滴度，将收集到的血清于56℃灭活30min，‑70℃保存备用，其中多肽P25的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示；（2）多肽P25表位抗体的制备，根据SulfoLink® Immobilization Kit试剂盒，将多肽P25稀释到500ug/mL，标记免疫亲和层析柱，将制备的新城疫病毒高免血清通过免疫亲和层析柱，最后用洗脱液洗脱多肽P25表位抗体，重复2~3次，将收集到的多肽P25表位抗体于‑20℃保存备用。
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