[发明专利]无细胞生成核糖核酸在审
申请号: | 201780033464.4 | 申请日: | 2017-04-06 |
公开(公告)号: | CN109196109A | 公开(公告)日: | 2019-01-11 |
发明(设计)人: | W.J.布莱克;D.S.康宁汉姆;D.麦凯克伦;J.R.阿布希尔;M.古普塔 | 申请(专利权)人: | 绿光生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12N1/06;C12N1/20 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本文中在一些方面提供了用于核糖核酸的无细胞生产的方法和组合物。 | ||
搜索关键词: | 核糖核酸 无细胞 生产 | ||
【主权项】:
1.生物合成核糖核酸(RNA)的无细胞方法,所述方法包括:(a)在导致RNA解聚的条件下,温育包含RNA和至少一种酶活性的细胞裂解物混合物以产生包含一磷酸核苷的细胞裂解物混合物,所述酶活性选自下组:解聚RNA的酶活性、热稳定性激酶活性和热稳定性RNA聚合酶活性;(b)将步骤(a)中产生的所述细胞裂解物混合物加热至使内源核酸酶和磷酸酶失活或部分失活而不使热稳定性激酶活性和热稳定性RNA聚合酶活性完全失活的温度,以产生包含热失活的核酸酶和磷酸酶的细胞裂解物混合物;和(c)在能量源和编码感兴趣RNA的脱氧核糖核酸(DNA)模板存在下,在导致三磷酸核苷产生和三磷酸核苷聚合的条件下,温育(b)中产生的所述细胞裂解物混合物以产生包含所述感兴趣RNA的细胞裂解物混合物。
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