[发明专利]一种近红外检测次氯酸根的方法

摘要

本发明提供了一种近红外检测次氯酸根的方法，是基于一种商业可得的近红外染料甲酚紫（CVA）检测次氯酸根（OCl‑）的方法。具体检测方法是：将CVA作为荧光试剂，在pH为7.4的PBS缓冲溶液中，高效选择性检测次氯酸根，探针用于定性和半定量目视检测微量次氯酸根。该检测方法，对次氯酸根显示了较高的灵敏性，检出限低至5.6×10‑8mol/L，检测过程简便、抗干扰能力强、快速、灵敏，检测结果准确，在生物分子检测领域具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种近红外检测次氯酸根的方法，其特征在于步骤如下：

（1）配制pH为7.4、浓度为10 mM的PBS缓冲溶液，并用乙醇配制浓度为1 mM的甲酚紫‑乙醇溶液；

（2）用蒸馏水配置60 μmol/L浓度的ClO^‑溶液，把3 mL的PBS缓冲溶液和30 μL的甲酚紫‑乙醇溶液加到干净的荧光比色皿中，依次加入体积为0、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL、25 μL的ClO^‑溶液，同时在荧光光谱仪上测定627 nm处的荧光发射强度，以ClO^‑的浓度为横坐标，以627 nm处的荧光发射强度为纵坐标，得到ClO^‑浓度的工作曲线，线性回归方程为：F_627 nm =8775.810‑684.324C，C的单位为μmol/L；

（3）将3000 μL的PBS缓冲溶液和30 μL的甲酚紫乙醇溶液加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取V μL待测样品溶液，加入到荧光比色皿中，在荧光光谱仪上测试，将测得的F_627 nm值代入步骤（3）的线性回归方程中，得到浓度C，待测样品的浓度C_待测样=3000μL*C*/VμL，C的单位为μmol/L。

2.根据权利要求1所述的近红外检测次氯酸根的方法，其特征在于：甲酚紫的结构式如下：

。

3. 根据权利要求2任一项所述的近红外检测次氯酸根的方法，其特征在于：所述甲酚紫探针检测次氯酸根的浓度为0‑0.5 µM，最低检出限为5.6×10^‑8 mol/L。

4.权利要求1‑3任一项所述的近红外检测次氯酸根的方法在检测细胞内次氯酸根的应用。

5.权利要求1‑3任一项所述的甲酚紫作为荧光试剂在检测次氯酸根中的应用。