[发明专利]葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法

摘要

葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法，属于中药制药分析技术领域。本发明方法采用高效液相色谱法，色谱条件为：流速1.00ml/ml；柱温：30℃；检测仪器采用紫外‑可见分光检测器，流动相以乙腈‑0.1％磷酸溶液为系统进行梯度洗脱。本发明指纹图谱全面反映出葶苈生脉口服液组合物的质量信息，从而可更加全面、有效地控制葶苈生脉口服液组合物制剂产品质量。

主权项

1.一种葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，建立葶苈生脉口服液指纹图谱，包括以下步骤：(1)选料：红参、黄芪、麦冬、五味子、葶苈子、桂枝、茯苓、白术、猪苓、泽泻、丹参、红花、川芎饮片；(2)口服液的制备，以下所述的份数为质量份，包括以下步骤：①取上述黄芪20‑30份、麦冬10‑20份药材，加10倍重量80％的乙醇水溶液，回流提取两次，每次1.5小时，得到提取液A，取药渣，晾干；另取茯苓10‑20份、猪苓10‑20份，与上述药渣A合并，加入8倍重量的水，回流提取1.5小时，将提取液浓缩至每1ml清膏中含生药量(黄芪、麦冬、茯苓、猪苓总药量)为0.6‑1.0g，调节温度至65℃，加入清膏体积1/4的质量百分含量1％壳聚糖水溶液，边加边匀速搅拌10分钟，静置24小时；离心，取上清液，加入5倍重量的质量95％的乙醇，搅拌均匀，再离心，分取沉淀得多糖；②取上述红参10‑20份、五味子10‑20份、川芎10‑20份、葶苈子10‑20份、泽泻30‑40份五味药材，加入4倍重量75％的乙醇，回流提取3次，第一次3h，第二次2h，第三次1h，收集得到提取液B，回收乙醇至溶液无醇味，备用；③取上述丹参10‑20份、红花10‑20份两味药材，加入10倍重量60％乙醇超声提取4次，每次50min；收集得到提取液C，回收乙醇至溶液无醇味，备用；④取上述桂枝10‑20份、白术10‑20份药材投入装有提油装置的提取‑共沸精馏，加入8倍重量水，浸泡3小时后，煮沸提油6小时，收集挥发油；⑤挥发油包合：取上述步骤④收集的挥发油至挥发油滴加器中，研钵中加入2倍重量水，加入羟丙基倍他环糊精，搅拌溶解，包合2h；⑥混合药液，即混合步骤①的提取液A、步骤②提取液B、步骤③提取液C混合浓缩，然后加入步骤①多糖、和步骤⑤包合的挥发油；提取液A、B、C混合浓缩时一般对应葶苈生脉方中的每20‑30g黄芪最后浓缩到100ml，加防腐剂适量，加蔗糖适量如40份，调节口感；(3)高效液相色谱条件：YMC J’sphere ODS‑H80‑C18(4.6mm×250mm，4μm)，流动相为乙腈(A)‑质量百分含量0.5％磷酸(B)，梯度洗脱即：0‑15min，15％‑21％A；15‑35min，21％‑26％A；35‑50min，26％‑34％A；50‑70min，34％‑61％A；70‑85min，61％‑75％A；85‑90min，75％‑95％A；90‑100min，95％‑100％A，流速1.0mL·min‑1，柱温30℃，进样量30μL；检测波长203nm，270nm，上述梯度洗脱过程中每个时间段内的乙腈占总流动相的体积百分含量是匀速提升的；(4)然后采用人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、羟基红花色素A、五味子甲素、黄芪甲苷对照品的高效液相色谱分别指代步骤(3)中对应的物质峰；即得最后的指纹图谱。