[发明专利]葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法

说明书

葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法，属于中药制药分析技术领域。本发明方法采用高效液相色谱法，色谱条件为：流速1.00ml/ml；柱温：30℃；检测仪器采用紫外‑可见分光检测器，流动相以乙腈‑0.1％磷酸溶液为系统进行梯度洗脱。本发明指纹图谱全面反映出葶苈生脉口服液组合物的质量信息，从而可更加全面、有效地控制葶苈生脉口服液组合物制剂产品质量。

技术领域

本发明属于中药制药分析技术领域，具体涉及葶苈生脉口服液的指纹图谱建立。

背景技术

充血性心力衰竭(简称CHF)，是指心血管疾病发展到一定的严重程度，心脏失代偿的一种临床综合征。据世界卫生组织调查，心血管疾病是当今全世界死亡率最高的疾病，占总死亡人数的40％。葶苈生脉组方是全国名老中医邢月朋根据多年临床经验总结出的治疗气虚血瘀、阳虚水停型CHF的经验方，经过临床验证能有效缓解患者症状，改善生活质量，减少住院时间。

产品标准方面，国外植物药产品主要采用指纹图谱技术控制产品质量，该项技术特别适用于成分复杂的中成药产品质量控制。在我国，国家食品药品监督管理局只要求中药注射剂必须采用指纹图谱技术控制产品质量，在中药其他制剂方面还是空白。本项目在药品质量评价指标的选择上应用指纹图谱，采用多成分和特征色谱峰群综合控制质量的方法，突破单一成分控制质量的模式。既充分考虑、强调了中医药理论的整体观念，符合传统中医理论，同时应用现代科学技术，质量控制手段先进、可行。

关于葶苈生脉方的口服药物如葶苈生脉口服液的组合物确认及图谱的建立目前还没有相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法，实现或得到的葶苈生脉口服液组合物指纹图谱。

一种葶苈生脉口服液组合物指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，建立葶苈生脉口服液指纹图谱，包括以下步骤：

(1)选料：红参、黄芪、麦冬、五味子、葶苈子、桂枝、茯苓、白术、猪苓、泽泻、丹参、红花、川芎饮片，鉴定符合2015版药典一部相关项下规定；

(2)口服液的制备，以下所述的份数为质量份，包括以下步骤：①取上述黄芪20-30份、麦冬10-20份药材，加10倍重量80％的乙醇水溶液，回流提取两次，每次1.5小时，得到提取液A，取药渣，晾干；另取茯苓10-20份、猪苓10-20份，与上述药渣A合并，加入8倍重量的水，回流提取1.5小时，将提取液浓缩至每1ml清膏中含生药量(黄芪、麦冬、茯苓、猪苓总药量)为0.6-1.0g，调节温度至65℃，加入清膏体积1/4的质量百分含量1％壳聚糖水溶液，边加边匀速搅拌10分钟，静置24小时；离心，取上清液，加入5倍重量的质量95％的乙醇，搅拌均匀，再离心，分取沉淀得多糖；②取上述红参10-20份、五味子10-20份、川芎10-20份、葶苈子10-20份、泽泻30-40份五味药材，加入4倍重量75％的乙醇，回流提取3次，第一次3h，第二次2h，第三次1h，收集得到提取液B，回收乙醇至溶液无醇味，备用；③取上述丹参10-20份、红花10-20份两味药材，加入10倍重量60％乙醇超声提取4次，每次50min；收集得到提取液C，回收乙醇至溶液无醇味，备用；④取上述桂枝10-20份、白术10-20份药材药材投入装有提油装置的提取-共沸精馏，加入8倍重量水，浸泡3小时后，煮沸提油6小时，收集挥发油；⑤挥发油包合：取上述步骤④收集的挥发油至挥发油滴加器中，研钵中加入2倍重量水，加入羟丙基倍他环糊精，搅拌溶解，包合2h；⑥混合药液，即混合步骤①的提取液A、步骤②提取液B、步骤③提取液C混合浓缩，然后加入步骤①多糖、和步骤⑤包合的挥发油；提取液A、B、C混合浓缩时一般对应葶苈生脉方中的每黄芪20-30g最后浓缩到100ml，加防腐剂适量，加蔗糖适量如40份，调节口感；