[发明专利]一种破伤风类毒素的精制方法

摘要

本发明提供一种破伤风类毒素的精制方法，其包括准备待纯化的破伤风类毒素原液；将破伤风类毒素原液加样于EMD DEAE(M)凝胶层析柱；采用平衡液对加样后的层析柱进行平衡，平衡后，采用洗脱液I洗脱所需的破伤风类毒素单体，收集含破伤风类毒素单体的洗脱液。本发明精制方法显著提高破伤风类毒素单体纯度，且其收率达40％以上，该方法获得的破伤风类毒素单体作为结合疫苗的载体蛋白能显著提高疫苗的免疫原性，为多糖‑蛋白质结合疫苗及其他以TT为联合疫苗组分的疫苗提供了更加安全有效的蛋白质。

主权项

1.一种破伤风类毒素的精制方法，其包括如下步骤：(1)准备待纯化的破伤风类毒素原液，并调节其pH为6.0～8.0，电导不大于10ms/cm；(2)将步骤(1)的破伤风类毒素原液加样于以EMD DEAE(M)为填料的凝胶层析柱；(3)采用平衡液对加样后的层析柱进行平衡，平衡后，采用洗脱液I洗脱所需的破伤风类毒素单体，收集破伤风类毒素单体的洗脱峰；优选地，步骤(3)中洗脱液I的流速为30～75cm/h；优选地，步骤(3)中采用纯化仪进行洗脱；更优选地，设置该纯化仪的监测波长为206～300nm。