[发明专利]一种脐血调节性T细胞体外扩增方法在审
| 申请号： | 201711305564.6 | 申请日： | 2017-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN108004209A | 公开（公告）日： | 2018-05-08 |
| 发明（设计）人： | 付亚茹;孙阳阳;王洪星;曲廷瑜 | 申请（专利权）人： | 山东省齐鲁干细胞工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250102 山东省济南市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脐血调节性T细胞体外扩增方法，它包括步骤：新鲜脐血，经Ficoll密度梯度离心法分离获得单个核细胞，将单个核细胞接种至预先包被anti‑CD3抗体的培养皿中，添加诱导培养液诱导Tregs细胞的体外扩增。本发明提供的方法能够自新鲜脐血中体外高效扩增获得高纯度的Tregs细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 调节 细胞 体外 扩增 方法 | ||
【主权项】：
1.一种脐血调节性T细胞体外扩增方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）细胞分离：新鲜脐血与PBS缓冲液1:1混合，缓慢加入等体积Ficoll淋巴细胞分离液中，密度梯度离心；收集单个核细胞白膜层，离心，弃上清液，获得脐血单个核细胞沉淀，细胞沉淀用PBS缓冲液重悬，离心，弃上清液，获得脐血单个核细胞；（2）细胞培养：将步骤（1）制得的单个核细胞和细胞培养液混合，得到细胞悬液，接种至包被anti-CD3抗体的增殖培养皿中，添加Tregs细胞增殖培养液诱导培养；（3）细胞扩增培养：培养至第6天，将细胞转移至不包被anti-CD3抗体的培养皿中，休整培养至第8天，将细胞再次转移至包被anti-CD3抗体的Tregs细胞增殖培养皿中，体外扩增培养第14天，收取扩增后的细胞。
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