[发明专利]一种表皮细胞生长因子的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种表皮细胞生长因子的制备方法及应用，将冷冻的乳样4℃解冻后，进行离心、透析、提取、纯化步骤，得到纯化表皮生长因子因子溶液，具有操作方法简便、提取的EGF的生物适应性高等优点，且该方法提取纯化的表皮生长因子溶液可以根据给药形式来确定其制剂的剂型，可接受药典上的赋形剂、稀释剂、载体等，通过口服给药的方式使EGF的功效能作用于全身，改变了EGF传统的给药方式，更好的发挥抗衰老作用。

主权项

1.一种表皮细胞生长因子的制备方法，其特征在于包含以下步骤：(1)材料选取选取健康奶羊的乳液进行取样，采样后立即在‑40℃冷冻保存备用；(2)离心处理将冷冻的乳样4℃解冻后，用移液枪吸取乳样置于离心管中，然后在5000r/min低温(4℃)离心10min，除去上层乳脂，取上清液；(3)透析将所述上清液装入截留分子量3500Da的透析袋，4℃对0.02mol/LTris‑HCL(8.0)透析30～50分钟，然后更换缓冲液重复透析，得到透析液；(4)提取将所述透析液过Q Sepharose Fast Flow柱(5.5cm*20cm)，进行洗脱，流速2～4ml/分钟的流速，先用300～500ml 0.002mol/LTris‑HCL(pH8.0)缓冲液洗脱杂蛋白峰、450～650ml 0.5mol/L NaCl的0.002mol/LTris‑HCL(pH8.0)的缓冲液进行洗脱，收集目标蛋白峰，并用紫外检测仪在280nm波长处进行检测。