[发明专利]一种用于敲除CCR5基因的gRNA、表达载体、敲除系统、试剂盒在审
| 申请号： | 201711220370.6 | 申请日： | 2017-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN108277222A | 公开（公告）日： | 2018-07-13 |
| 发明（设计）人： | 陶米林;罗思施;祝海宝;梁福才;黄雨亭;唐忆琳;刘方方 | 申请（专利权）人： | 广东赤萌医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/90;C12N15/85;A61K48/00;A61P31/18 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 宋静娜;郝传鑫 |
| 地址： | 510000 广东省广州市高新*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于敲除CCR5基因的gRNA、基因敲除系统及试剂盒，所述基因敲除系统通过Nickase蛋白结合一对RNA嵌合体来进行，联合使用一对RNA嵌合体分别结合于靶基因的正义链和反义链，通过Nickase的作用分别在两条链上产生一个缺口，形成带粘性末端的双链断裂，然后细胞通过NHEJ机制将双链修复并引入突变，即可实现基因敲除，并且双RNA嵌合体的使用让gRNA和靶序列的识别位点从20nt扩大到40nt，大大地减少了潜在的脱靶可能性。此外，本发明还公开了所述gRNA在制备用于预防或治疗HIV感染的药物中的用途，实现了敲除细胞表面的HIV病毒辅助受体CCR5，在有效进行CCR5基因敲除的前提下，大大减少脱靶效率，提高临床使用的可行性，降低安全风险。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 基因敲除 嵌合体 试剂盒 表达载体 蛋白结合 辅助受体 双链断裂 细胞表面 细胞通过 粘性末端 靶基因 靶序列 反义链 潜在的 识别位 正义链 双链 条链 制备 突变 修复 引入 预防 治疗 安全 | ||
【主权项】：
1.一种用于敲除CCR5基因的gRNA，其特征在于，所述gRNA的靶序列如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:114中的一种所示。
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