[发明专利]一种基于水溶性阳离子共轭聚合物材料检测DNA的方法在审

专利信息
申请号: 201711184127.3 申请日: 2017-11-23
公开(公告)号: CN108085368A 公开(公告)日: 2018-05-29
发明(设计)人: 汪联辉;鲍碧清;潘艳锐 申请(专利权)人: 南京邮电大学
主分类号: C12Q1/6818 分类号: C12Q1/6818;C12Q1/682
代理公司: 南京知识律师事务所 32207 代理人: 李吉宽
地址: 210023 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于水溶性阳离子共轭聚合物材料检测DNA的方法。当目标DNA加入到H1和染料修饰的H2形成的探针溶液中时,目标DNA和探针上的H2链杂交,利用Exonuclease III降解H2,释放出目标DNA和H1,进行酶切循环反应,最后加入水溶性阳离子共轭聚合物材料(CCP),CCP与溶液中游离的荧光素无法发生荧光共振能量转移。目标DNA不存在时,通过静电作用,CCP与DNA链相连的荧光素发生荧光共振能量转移,利用双重信号放大实现目标DNA的检测。本发明具有制备方法简单、不需要复杂的设备、对目标DNA有很高的特异性和灵敏度的优点,可广泛应用于分子生物学、临床检测、生物传感器等领域,实现对生物分子、小分子的检测。
搜索关键词: 目标DNA 共轭聚合物材料 水溶性阳离子 荧光共振能量转移 检测 荧光素 分子生物学 生物传感器 静电作用 临床检测 生物分子 双重信号 探针溶液 循环反应 灵敏度 小分子 染料 降解 酶切 探针 修饰 制备 游离 放大 杂交 释放 应用
【主权项】:
1.一种基于水溶性阳离子共轭聚合物材料检测DNA的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)制备水溶性阳离子共轭聚合物材料,并且溶于超纯水中;(2)将DNA链H1和染料修饰的DNA链H2在配好的缓冲溶液中进行培育、杂交;(3)加入目标DNA进行培育、杂交;(4)Exonuclease III降解与目标DNA杂交的双链探针上的H2;(5)加入水溶性阳离子共轭聚合物水溶液,以404nM波长激发,进行荧光检测,根据荧光共振能量转移对目标DNA进行定性检测。
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