[发明专利]一种从柴胡中提取柴胡皂苷的方法

摘要

本发明涉及一种从柴胡中提取柴胡皂苷的方法。本发明是将新鲜柴胡根晒干成柴胡饮片，然后用破壁机进行一次破壁，用高压纯化空气切割粉碎机进行二次破壁，破壁后的柴胡粉用醋酸钠溶液和无水乙醇提取柴胡皂苷和去除杂质，得到的柴胡皂苷粗提取液再经过制备型高效液相色谱仪进行精制，最后经过真空冷冻干燥得到柴胡皂苷粉末。本发明采用先将柴胡的细胞进行破壁再提取柴胡皂苷的工艺，细胞破壁率最高达99.4%，柴胡皂苷提取率最高达92%以上，低温破壁和温和提取方法，能有效避免柴胡皂苷的化学结构发生变化，保证柴胡皂苷良好的药物活性。

主权项

一种从柴胡中提取柴胡皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将新鲜柴胡根洗净、切片，晒干至含水量为8%~12%，得到柴胡饮片；（2）将柴胡饮片放入‑196℃的液氮中冷冻1~3 min，迅速取出放入破壁机，以20000~40000 rpm的转速进行破壁处理1~3 min，得到一次破壁的柴胡粉；（3）将一次破壁的柴胡粉调节含水量至3%~5%，冷冻至‑60~‑80℃，用高压纯化空气切割粉碎机进行二次破壁，空气压力为100~200 mPa，空气流速为600~800 m/s，进料速度为6~10 g/s，进料周期为2‑5 s，进料压力为0.2~0.3 mPa，得到二次破壁的柴胡粉；（4）将二次破壁的柴胡粉、2‑5 mol/L的醋酸钠溶液和无水乙醇按照1:3~5:6~15的质量比混合，在40‑60℃下搅拌15~45 min，然后于0~4℃下静置30~60 min，然后0~4℃下10000~15000 rpm离心10~30 min，取上层清液，得到柴胡皂苷粗提取液；（5）以制备型高效液相色谱仪对柴胡皂苷粗提取液进行精制，色谱柱为C18反相硅胶色谱柱，填料粒径为5 μm，内径为7.8 mm，长度为300~350 mm，洗脱条件为：0~10 min为100%双蒸水，10‑20 min为体积比10%~20%：80%~90%的无水乙醇和双蒸水，20‑30 min为体积比30%~40%：60%~70%的无水乙醇和双蒸水，30‑40 min为体积比50%~60%：40%~50%的无水乙醇和双蒸水，40‑50 min为体积比70%~80%：20%~30%的无水乙醇和双蒸水，50‑60 min为100%的无水乙醇，洗脱液流速为1~2 mL/min，将含有柴胡皂苷的洗脱成分回收，得到精制的柴胡皂苷洗脱液；（6）将精制的柴胡皂苷洗脱液在‑10~‑30℃、‑0.08~‑0.1 MPa条件下进行真空冷冻干燥，得到柴胡皂苷粉末。