[发明专利]一种从柴胡中提取柴胡皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明天然产物提取技术领域，尤其是涉及一种从柴胡中提取柴胡皂苷的方法。

背景技术

柴胡，别名地熏、山菜、菇草、柴草，为《中国药典》收录的草药，药用部位为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根。柴胡性味苦、微寒，归肝、胆经，有和解表里，疏肝升阳之功效，用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱垂、月经不调。

柴胡皂苷结构均为五环三萜类齐墩果烷型衍生物，其苷元分为7种不同类型：环氧醚(Ⅰ)，异环双烯(Ⅱ)，12-烯(Ⅲ)，同环双烯(Ⅳ)，12烯- 28-羧酸(Ⅴ)，异环双烯-30-羧酸(Ⅵ)，18-烯型(Ⅶ)。柴胡皂苷中一般只含葡萄糖、呋糖、鼠李糖和木糖，此外，除以上各种糖外还有戊糖醇(pentitol)。至今为止，共研究了该属20多种柴胡，从柴胡属植物已分离出90多种皂苷类成分，发现了30多种新化合物。近10年分离鉴定的皂苷为43个，文献报道较多的是柴胡皂苷a、b、c、d等,皂苷绝大部分是从柴胡根中分得，地上部分分得的皂苷极少。

各种不同类型的柴胡皂苷都具有重要的药理作用：柴胡皂苷a显著抑制三磷酸腺苷诱发的血小板聚集，与阿司匹林作用相当，且以剂量依赖抑制内源性花生四烯酸生成血栓素。柴胡皂苷a、d具有类甾环样结构，Dobashi等研究发现:给小鼠口服柴胡皂苷0.2～2.0 mg/kg后发现血清中的促肾上腺皮质激素(ACTH)明显增高，而且腺垂体中的ACTH前体、下丘脑中的促肾上腺皮质激素生成激素(CRF)mRNA的水平也明显增高，并呈剂量依赖性，而柴胡皂苷a却没有这种作用。Chiang LC等利用HBV转染的人类肝癌细胞观察柴胡皂苷a、c、d的作用发现,柴胡皂苷c可明显抑制培养基中HbeAg的表达,HBV-DNA的复制也得到了有效抑制，提示柴胡皂苷可阻止乙型肝炎向肝纤维化的转化。在抗肾小球基底膜型肾炎及Heymann肾炎的大鼠模型中，柴胡皂苷d在疾病早期、晚期2个阶段给药，发现可减轻尿蛋白，降低血脂，减轻肾小球病理变化；肾小球内IgG、C3的沉积较对照组显著减少；血清中促肾上腺皮质激素、皮质酮、肾组织中糖皮质激素受体(GR)均有所增高。提示柴胡皂苷d可能通过刺激HPA轴,增强糖皮质激素的功能，抑制花生四烯酸等代谢产物的生成,从而抑制了炎症的发生。柴胡皂苷a、d、f可增加小鼠T、B淋巴细胞的活性及白细胞介素- 2(IL-2)的分泌水平，柴胡皂苷a、d还可以使血浆中IgA、IgG、IgM水平提高,以柴胡皂苷d活性最强。柴胡皂苷d作用下,巨噬细胞的扩展性、酸性磷酸酶活性,化学发光等呈剂量依赖性增加。Motoo Y等研究了柴胡皂苷不同组分对肝、胰腺肿瘤细胞的作用,发现肝肿瘤细胞50%抑制时,柴胡皂苷d浓度为20 mg/mL，柴胡皂苷a的浓度为50 mg/mL，柴胡皂苷b2、c> 1 000 mg/mL。柴胡皂苷a 50 mg/mL可抑制这2种肿瘤细胞的生长和DNA的合成。Chiang LC等的研究还发现柴胡皂苷d通过活化Caspase3，Caspase7诱导HepG2人类肝肿瘤细胞凋亡,从而实现抗肿瘤的作用。Tsai YJ等用柴胡皂苷a、b1、b2、c、d诱导小鼠C6胶质瘤细胞分化。柴胡皂苷a、d可抑制细胞增殖,改变细胞形态，而且柴胡皂苷a可显著抑制谷氨酰胺合成酶和环核苷酸磷酸水解酶的活性。