[发明专利]以聚电解质球刷为酶结合物载体的酶联免疫检测方法有效
| 申请号： | 201711051087.5 | 申请日： | 2014-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN107843727B | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 徐宏;瞿振元;古宏晨 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | G01N33/531 | 分类号： | G01N33/531 |
| 代理公司： | 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 郑立 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶固定化载体的制备方法及应用，尤其公开了一种利用聚电解质球刷为载体，采用静电吸附后化学偶联法实现对酶的固定化，并将制备得到的复合物应用于酶联免疫检测。本发明的方法实现了酶的高结合量和高活性，应用于酶联免疫检测中，显著提高酶联免疫检测的灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 酶联免疫检测 制备 应用 化学偶联 静电吸附 聚电解质 酶固定化 灵敏度 复合物 高活性 固定化 结合量 | ||
【主权项】：
1.一种聚电解质球刷-酶-抗体复合物，其特征在于，聚电解质球刷-酶复合物通过用静电吸附后化学偶联法将酶以共价键固定于聚电解质球刷内部制备而成，用共价偶联过程将抗体共价固定于聚电解质球刷外侧，得到所述聚电解质球刷-酶-抗体复合物。/n
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- 本发明提供一种使用密度梯度分层离心法进行抗原修复的方法，包括如下步骤:S1.宫颈细胞样本采集；S2.在离心管中加入样本密度分离液，然后吸取细胞样本转移至离心管中；S3.进行两次离心，第一次离心在200g离心力作用下离心2min，然后将上层液体吸走；剩余液体第二次离心在800g离心力作用下离心5min，最后缓慢倒掉上清液；S4.观察离心管底部的细胞沉淀量，根据沉淀量的多少添加缓冲液；最后制成细胞悬液。本发明创新性地使用密度梯度分层离心法进行抗原修复，在不需要高温高压的条件下，也能达到与热修复法同样的抗原修复效果。避免了抗原修复要采用热修复而使用到的具有安全风险的加热仪器设备，且使得整个实验过程比较高效快捷。
- 一种脑卒中标志物免疫传感器的制备方法和检测方法-201910694102.0
- 孙保亮;王莹;杨明峰;袁慧;毛蕾蕾;董其威;曹荷清 - 山东第一医科大学(山东省医学科学院)
- 2019-07-30 - 2019-11-19 - G01N33/531
- 本发明属于免疫传感器技术领域，涉及一种脑卒中标志物免疫传感器的制备方法和检测方法。本发明SERS信号发生明显变化，实现SERS强度检测的方法来进行浓度的评价，从而提高检测的准确性。有效利用了纳米材料的特性，利用拉曼光谱仪进行检测，极大地降低了检测成本，本发明具有成本低、快速、简便、敏感且可重复性好等优点。基于表面修饰拉曼信号分子，产生SERS变化，可实现对不同抗原浓度的评价。纳米颗粒的比表面积大，进一步提高了检测的灵敏度和稳定性，该传感器制备方法简单、成本低、灵敏度高、稳定性好。检测只需要一步即可，检测步骤简单方便，不容易出错。
- 一种氨基酸序列发生变异的轮状病毒VP6基因及免疫层析试纸条-201910844679.5
- 朱传刚;周志平;冒丽;刘冀;江嘉欣;吴思敏;李嘉静;纪荣毅;沈元曦 - 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心);尼沃诺斯(苏州)生物工程有限公司
- 2019-09-07 - 2019-11-19 - G01N33/531
- 本发明提供一种氨基酸序列发生变异的轮状病毒VP6基因及免疫层析试纸条，所述轮状病毒胶体金免疫层析试纸条设有载体板、样品垫、胶体金结合垫、层板膜、检测线、质控线和吸收垫。利用重组VP6蛋白作为检测抗原，使用最经典的柠檬酸三钠还原法制备了胶体金颗粒，完成了轮状病毒免疫层析试纸条的研制与猪猪轮状病毒阳性血清可发生特异性结合，初步建立了诊断轮状病毒的快速诊断方法。
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