[发明专利]一种鉴定易成花荔枝种质资源的方法

摘要

本发明属于荔枝遗传育种技术领域，具体涉及一种鉴定易成花荔枝种质资源的方法。发明人根据荔枝LcFT1基因“EFT”型和“DFT”型启动子各自的特异性开发两对引物(EFT‑F和EFT‑R、DFT‑F和DFT‑R)用于鉴定易成花荔枝种质资源。本发明所提供的方法可在DNA水平上对易成花荔枝种质资源进行鉴定，具有方法简便、效率高、鉴定结果准确以及不受外界环境影响等特点，有助于建立易成花荔枝新种质的育种体系，具有广泛的应用前景。

主权项

一种鉴定易成花荔枝种质资源的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)收集不同荔枝种质资源，并提取它们的DNA；(2)荔枝LcFT1基因启动子有两个类型，分别为“EFT”型和“DFT”型，且含有“EFT”型启动子的荔枝种质资源容易成花；根据LcFT1基因“EFT”型启动子的特异性设计一对上下游引物EFT‑F和EFT‑R，PCR扩增的目的条带大小为262bp，其具有如Seq ID NO.5所示的序列，用于检测LcFT1基因“EFT”型启动子；根据LcFT1基因“DFT”型启动子的特异性设计一对上下游引物DFT‑F和DFT‑R，PCR扩增的目的条带大小为202bp，其具有如Seq ID NO.6所示的序列，用于检测LcFT1基因“DFT”型启动子；(3)PCR扩增检测：分别以待检测荔枝种质资源的DNA为模板进行PCR扩增，扩增的PCR产物经1.5％浓度的琼脂糖电泳检测；(4)易成花荔枝种质资源的鉴定：如果通过引物EFT‑F和EFT‑R扩增到262bp大小的目的条带，通过引物DFT‑F和DFT‑R扩增不到202bp大小的目的条带，则表明待检测荔枝为纯合“EFT”型易成花荔枝种质资源；如果通过引物EFT‑F和EFT‑R扩增到262bp大小的目的条带，通过引物DFT‑F和DFT‑R扩增到202bp大小的目的条带，则表明待检测荔枝为杂合型易成花荔枝种质资源。