[发明专利]一种黄牛KCNJ12基因CNV标记辅助检测生长性状的方法及其专用试剂盒

摘要

本发明公开了一种黄牛KCNJ12基因CNV标记辅助检测生长性状的方法及其专用试剂盒：基于实时荧光定量PCR技术，以郏县红牛的血液全基因组DNA为模板，利用特异引物P1扩增牛KCNJ12基因的拷贝数变异区域，同时利用另外一对特异性PCR引物R1扩增郏县红牛BTF3基因作为对照，然后利用2‑ΔΔCt的计算结果判定个体的拷贝数是否有缺失。本发明提供的方法建立在郏县红牛KCNJ12基因拷贝数缺失与生长性状之间的关联性基础之上，有利于加快黄牛分子标记辅助选择育种工作，方法简单、快速，便于推广应用。

主权项

一种检测黄牛KCNJ12基因CNV标记的方法，其特征在于：包括以下步骤：利用实时荧光定量PCR，以黄牛基因组DNA为模板，以引物对P1为引物，扩增KCNJ12基因的拷贝数变异位点的片段，同时以引物对P2为引物扩增作为内参的BTF3基因的部分片段，然后根据定量结果鉴定黄牛KCNJ12基因的拷贝数变异类型；所述的引物对P1为：上游引物F1：5’‑CCAAAAGCCATTTCTGGGGC‑3’下游引物R1：5’‑ACCTTGAGGCTGGGATGTTG‑3’；所述的引物对P2为：上游引物F2：5’‑AACCAGGAGAAACTCGCCAA‑3’下游引物R2：5’‑TTCGGTGAAATGCCCTCTCG‑3’。