[发明专利]一种荧光测定DNA连接酶活性的方法在审
申请号: | 201710870827.1 | 申请日: | 2017-09-24 |
公开(公告)号: | CN108220386A | 公开(公告)日: | 2018-06-29 |
发明(设计)人: | 王亮;郑春阳 | 申请(专利权)人: | 天津强微特生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/25 | 分类号: | C12Q1/25 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300384 天津市南开*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明属于分子生物学技术领域,根据DNA连接酶把小片段的DNA连接为大片段的DNA时,DNA片段的熔点(Tm值)发生了变化,改变了原茎环结构的DNA构象,形成G‑四联体(鸟嘌呤‑四联体),G‑四联体可结合硫代黄素T后在490 nm处发出荧光,从而检测DNA连接酶的活性。本方法无需放射性同位素的使用,也不需要合成昂贵的含荧光基团的DNA,也不用电泳胶,操作快速简便。不仅可以快速对DNA连接酶活力定量,也可以研究各种不同化学物对DNA连接酶活性的影响。 | ||
搜索关键词: | 联体 放射性同位素 分子生物学技术 熔点 硫代黄素 荧光测定 荧光基团 电泳胶 化学物 环结构 鸟嘌呤 小片段 荧光 构象 原茎 合成 大片 检测 研究 | ||
【主权项】:
1.一种荧光测定DNA连接酶活性的方法,其特征在于, DNA连接酶把小片段的DNA连接为大片段的DNA时,DNA片段的熔点(Tm值)发生了变化,改变了原茎环结构的DNA构象,形成G‑四联体(鸟嘌呤‑四联体),G‑四联体可结合硫代黄素T后在490 nm处发出荧光,最后以荧光值为基础推导出DNA连接酶的活力。
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