[发明专利]猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因SYBRGreenI荧光定量PCR诊断试剂盒在审
| 申请号： | 201710542037.0 | 申请日： | 2017-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN107312841A | 公开（公告）日： | 2017-11-03 |
| 发明（设计）人： | 余波;尚以顺;徐景峨;杨莉;周思旋 | 申请（专利权）人： | 贵州省畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙)52110 | 代理人： | 谷庆红 |
| 地址： | 550005 贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明涉及试剂盒技术领域，尤其是猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒，包括40μL混合引物、250μL Premix Ex Taq、20μL ROX Reference Dye、100μL DL2000、500μL RNase Free dH2O、20μL阳性对照、20μL阴性对照，根据GenBank中猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药的floR基因序列，设计1对特异性引物，将扩增出的floR基因片段，克隆到pMD‑18T载体上，构建floR基因阳性标准品；对大肠杆菌磺胺类耐药菌株，β‑内酰胺类耐药菌株、大环内酯类耐药菌株均为阴性，灵敏度可达1.0×101拷贝/μL，重复性好，耐药表型和耐药基因检测符合率为96.7％。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 氟苯尼考 耐药 基因 sybrgreeni 荧光 定量 pcr 诊断 试剂盒 | ||
【主权项】：
猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒，其特征在于，包括40μL混合引物、250μL Premix Ex Taq、20μL ROX Reference Dye、100μL DL2000、500μL RNase Free dH2O、20μL阳性对照、20μL阴性对照；其中，混合引物包括上游引物和下游引物，上游引物为5`‑GCTCAACGTGAGTTGGATCATA‑3`，下游引物为5`‑CACTGCTGCTGATGGCTCCTTTC‑3`。
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