[发明专利]一种高生物利用度化橘红提取物的制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种高生物利用度化橘红提取物的制备方法和应用。该方法包括以下操作步骤1.以市售化橘红提取物为原料制备提取物溶液，2.提取物的糖苷酶催化糖基化，3.糖基化产物的膜分离与浓缩，4.高生物利用度化橘红糖基化提取物的干燥与收集。所述应用是所述高生物利用度化橘红提取物在制备药物制剂、保健品或特殊配方食品中的应用。本发明的高生物利用度化橘红提取物是采用生物酶转化技术实现化橘红提取物黄酮的糖基化，从而提高其在水中的溶解度和体外溶出速度，同时可以提高其生物利用度。

主权项

一种高生物利用度化橘红提取物的制备方法的生产工艺，其特征在于操作步骤如下：(1)制备化橘红中黄酮化合物溶液以市售质量浓度为50～70％的化橘红中的黄酮化合物溶于氢氧化钠或氢氧化钾溶液的摩尔浓度为0.1～1mol/L中，在30～40℃条件下处理30min，即制备出化橘红中的黄酮化合物溶液。(2)制备化橘红中的黄酮化合物超滤溶液第(1)步完成后，先将第(1)步制备出的化橘红中的黄酮化合物溶液泵入截留分子量为1000～2000Da的聚醚砜膜超滤器中，控制超滤压力为0.1～0.3MPa，进行超滤处理，直至超滤截留液体积降低至化橘红中的黄酮化合物溶液体积的1/10～1/20时停止，分别收集超滤滤过液和超滤截留液，对收集的超滤滤过液，即为化橘红中的黄酮化合物超滤溶液。超滤截留液可在(1)中再次利用。(3)制备糖基化化橘红中的黄酮化合物反应液第(2)步完成后，在超滤滤过液加入糖苷转移酶：环糊精的质量比为1:20～80投入到反应釜中，60～70℃恒温搅拌15～20h，然后泵入4000～5000Da的聚醚砜膜超滤器中，在温度不高于50℃、流速不低于15mL/min、操作压力0.6～1.2MPa的条件下超滤分离回收，截留液中主要为糖苷转移酶，返回到糖苷转移酶容器中重复利用。对收集的超滤液，泵入截留分子量为150～500Da的纳滤器中，控制纳滤压力为1～1.2MPa，进行纳滤处理，直至纳滤截留液体积降低至抽滤液体积的1/5～1/10时停止，分别收集纳滤滤过液和纳滤截留液，对收集的纳滤滤过液，含少量氢氧化钠，送入生化处理池净化达标后排放；对收集的纳滤截留液，即为糖基化化橘红中的黄酮化合物反应液，将截留液在温度40～50℃、真空度0.09～0.lMPa的条件下减压浓缩至膏状，用于制备糖基化化橘红中的黄酮化合物冻干粉，颜色为黄色。所用糖苷转移酶的活性不低于100U/mg的糖苷转移酶，即环糊精葡萄糖苷转移酶、麦芽糖基转移酶、4‑α‑葡萄糖转移酶、α‑淀粉酶中的一种或一种以上混合物。(4)制备糖基化化橘红黄酮化合物冻干粉第(3)步完成后，将第(3)步收集的糖基化化橘红中的黄酮化合物浓缩液置于‑18～‑40℃的低温冰箱中预冻4～l0h，再送入冷冻干燥机中，在40～60Pa的绝对真空度、‑50～‑60℃温度下，进行冷冻干燥24～48h，就制出糖基化化橘红黄酮冻干粉，其收得率为80.2～86.1％，平均分子量为1450Da。(5)高生物利用度化橘红糖基化提取物冻干粉溶出度研究第(4)步完成后，将第(4)步收集的高生物利用度化橘红糖基化提取物的冻干粉，制成化橘红糖基化提取物‑聚乙烯吡咯烷酮K30颗粒剂，然后测定化橘红糖基化提取物‑聚乙烯吡咯烷酮K30颗粒剂的溶出速率。(6)糖基化后化橘红黄酮化合物的药代动力学研究第(4)步完成后，将第(4)步收集的高生物利用度化橘红糖基化提取物，用PBS配成溶液，测定其在大鼠体内的代谢情况。