[发明专利]一种围产期脐带源间充质干细胞主细胞库的制备方法

摘要

本发明公开了一种围产期脐带源间充质干细胞主细胞库的制备方法，包括如下步骤S1.将新生儿脐带无菌采集；S2.对产妇进行病原微生物筛查，对脐带样本进行无菌检测；S3.将脐带样本洗净，消毒，生理盐水漂洗；S4.用生理盐水灌注血管，挤出残血，将脐带样本剪碎成组织块，漂洗；S5.将明胶用去离子水溶解，湿热灭菌,冷却，加入2XDMEM（L）混匀；S6.取组织块，加入明胶溶液，转移至组织培养瓶中，4℃冰箱中过夜后，加入完全培养基，置于CO2培养箱内至细胞长满凝胶层；S7.收获时以胰蛋白酶消化法收获细胞，经细胞筛过滤、离心获得P0代MSCs，P0代MSCs冻存，即为脐带源MSCs主细胞库。

主权项

一种围产期脐带源间充质干细胞主细胞库的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.将足月剖腹产健康新生儿脐带进行无菌采集；S2.对产妇进行病原微生物筛查，对脐带样本进行无菌检测；S3.将脐带样本在生理盐水中洗净残血，用消毒酒精浸泡，再经生理盐水漂洗两次；S4.用生理盐水灌注血管，挤出残血，将脐带样本剪碎成组织块，用生理盐水漂洗3次；S5.将明胶用去离子水溶解，湿热灭菌,冷却，缓慢加入2XDMEM（L），水浴摇床混匀；S6.取组织块，加入明胶溶液，转移至组织培养瓶中平铺，置于4℃冰箱中过夜后，向培养瓶中加入完全培养基，置于37℃，5% CO2培养箱内培养，至细胞长满凝胶层时收获；S7.收获时以胰蛋白酶消化法收获细胞，经细胞筛过滤、离心获得P0代MSCs，P0代MSCs冻存，即为脐带源MSCs主细胞库。