[发明专利]高浓度虫草多糖的发酵方法

摘要

本发明提供一种高浓度虫草多糖的发酵方法，极大的优化了蛹虫草多糖发酵的工艺条件，有效缩短了发酵周期和生产成本，提高整体的生产效率以及发酵生产出的虫草多糖的浓度，为现代工业化虫草多糖的发酵生产的提供有力支持。

主权项

一种高浓度虫草多糖的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将蛹虫草菌种接种到PD 液体发酵培养基中，进行活化培养，然后按体积百分数10‑15% 的接种量接到种子发酵培养基中，进行种子培养，种子培养条件为：温度20‑25℃，摇床培养2‑4 天，得种子液；（2）将步骤（1）制得种子液按5‑10 % 体积比接种于液体发酵培养基中，在温度20‑25℃的条件下，液体发酵培养1‑6 天，然后加入活性发酵液，使裂壶藻发酵蛋白产物的浓度为0.15‑0.85 mg/mL，然后继续培养2‑9 天，分离，得到蛹虫草菌丝体和发酵液；（3）从步骤（2）制得的发酵液中提取蛹虫草胞外多糖，从步骤（2）制得的蛹虫草菌丝体中提取蛹虫草胞内多糖，混合蛹虫草胞外多糖和蛹虫草胞内多糖，即得虫草多糖；所述步骤（1）中的种子发酵培养基，每升组分如下：3 g 葡萄糖、1.5 g 酵母粉上清液、0.1 g MgSO4、0.03 g CaCl2、0.1 g KH2PO4、0.1 gK2HPO4，2‑5 颗直径3‑6 mm 的玻璃珠；所述步骤（2）中的液体发酵培养基，每升组分如下：3 g 乳糖、2 g 糖蜜、2 g 豆粕粉、1.5 g 蛋白胨，0.1 g MgSO4、0.03 g CaCl2、0.1 g KH2PO4、0.1 g K2HPO4 ；所述活性发酵液为裂壶藻发酵产物，其制备方法为：取经过清洗的裂壶藻原料，设定酶解条件为料液比1∶10（ m/V）、纤维素酶Cellulase ACCF‑4740 添加量2%、温度55 ℃、 pH 4.5、反应时间1.3 h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15 min，9000 r/min离心，收集上清液得到裂壶藻纤维素酶水解液；裂壶藻酶解液灭酶活后，调节pH值至6.2‑6.6，高压蒸汽灭菌（121 ℃，20 min），然后接种体积分数1%的MRS培养基活化的戊糖片球菌液到裂壶藻酶解液， 37 ℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后， 9000 r/min离心，收集上清液得到裂壶藻发酵产物，即为制备的活性发酵液。