[发明专利]多交叉恒温扩增结合金纳米生物传感检测霍乱弧菌的方法有效
| 申请号： | 201710323212.7 | 申请日： | 2017-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN107167602B | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | 叶长芸;王毅;王艳 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/558 |
| 代理公司： | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人： | 李新军 |
| 地址： | 102206 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种多交叉扩增结合金纳米生物传感检测霍乱弧菌的方法，所述方法在多交叉置换扩增中的交叉引物CP1或CP2的5’端标记生物素，在扩增引物C1或C2的5’端标记半抗原，所述方法针对霍乱弧菌的ompW基因的扩增产物能被金纳米生物传感器可视化检测。所述方法便捷、快速、敏感、特异，适宜于各种核苷酸片段检测。 | ||
| 搜索关键词： | 霍乱弧菌 传感检测 纳米生物 结合金 扩增 核苷酸片段检测 纳米生物传感器 可视化检测 标记生物 恒温扩增 交叉引物 扩增产物 扩增引物 半抗原 置换 敏感 | ||
【主权项】：
1.一种多交叉恒温扩增结合金纳米生物传感检测目的基因的方法，所述方法包括以下步骤：（1）提取待检测样品的基因组；（2） 提供置换引物F1和F2，所述置换引物F1的序列如SEQ ID NO:1所示，所述置换引物F2的序列如SEQ ID NO:2所示；提供交叉引物CP1和CP2，所述交叉引物CP1的序列如SEQ ID NO:3所示，所述交叉引物CP2的序列如SEQ ID NO:5所示；同时提供在交叉引物CP1的5’端标记有生物素的交叉引物 CP1*；提供扩增引物C1和C2，D1和D2，R1和R2，引物C1的序列如SEQ ID NO:6所示，引物C2的序列如SEQ ID NO:8所示；引物D1的序列如SEQ ID NO:9所示，引物D2的序列如SEQ ID NO:10所示，引物R1的序列如SEQ ID NO:11所示，引物R2的序列如SEQ ID NO:12所示；同时提供在所述扩增引物C1的5’端标记荧光素的扩增引物C1*；（3）在链移位型聚合酶、解链温度调节剂、引物存在下，使用待检测样品的基因组核酸作为模板恒温扩增DNA；（4）使用金纳米生物传感器检测步骤（3）的扩增产物。
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