[发明专利]基于叶绿素荧光成像的转基因玉米草甘膦耐受性表型的检测方法

摘要

本发明公开一种基于叶绿素荧光成像的转基因玉米草甘膦耐受性表型的检测方法，包括：(1)制备实验样本；(2)获取受草甘膦胁迫不同天数的转基因玉米和非转基因玉米植株冠层叶片的莽草酸含量；(3)通过叶绿素荧光成像系统获取受草甘膦胁迫不同天数的转基因玉米和非转基因玉米植株冠层的叶绿素荧光参数；(4)建立PLSR模型，剔除异常样本，经K‑Means选择建模集和预测集；(5)利用主成分分析选择对草甘膦胁迫响应最敏感的叶绿素荧光参数；(6)基于选择的叶绿素荧光参数和转基因玉米植株实际的莽草酸含量建立PLSR回归分析模型，建模集和预测集决定系数为R²＝0.75，R²＝0.63。本发明鉴别精度较高、操作简单，可实现转基因玉米草甘膦耐受性表型的快速无损检测。

主权项

1.一种基于叶绿素荧光成像的转基因玉米草甘膦耐受性表型的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)种植同等数量的转基因玉米和非转基因玉米，在玉米生长过程中，对一部分数量的转基因玉米和非转基因玉米喷施浓度为1080g a.e.ha^‑1的草甘膦溶液作为实验组，对剩余的转基因玉米和非转基因玉米喷施等量的水作为对照组；(2)通过制定莽草酸标准曲线结合紫外分光光度法，获得受草甘膦胁迫不同天数的转基因玉米和非转基因玉米的植株冠层叶片的莽草酸含量；(3)应用叶绿素荧光成像系统，获取受草甘膦胁迫不同天数的转基因玉米和非转基因玉米的植株冠层的荧光参数；(4)采用主成分分析，选择对草甘膦胁迫响应最敏感的叶绿素荧光参数；(5)通过k‑means方法在实验组和对照组内选择建模集和预测集；(6)以建模集内样本选择的叶绿素荧光参数作为输入，莽草酸含量作为输出，建立转基因玉米莽草酸PLSR回归分析模型；(7)将预测集内样本的叶绿素荧光参数输入所述转基因玉米莽草酸PLSR回归分析模型，得到对样本的莽草酸含量。