[发明专利]鸡传染性法氏囊病灭活疫苗及其制备方法

摘要

本发明属于生物制品领域，具体涉及鸡传染性法氏囊病灭活疫苗及其制备方法，其包括以下步骤：A)LMH细胞的传代与培养；B)病毒接种；C)制苗毒液的繁殖；D)成品的制备。采用该方法制备得到的疫苗效力稳定，免疫效力高、安全性高，且其生产工艺简单，易操作。

主权项

鸡传染性法氏囊病灭活疫苗的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A)LMH细胞的传代与培养：取LMH传代细胞系经EDTA‑胰酶细胞分散液消化传代，在培养瓶中以细胞生长液继续培养，形成良好单层时，用于传代或接种病毒；B)病毒接种：取鸡传染性法氏囊病毒B87株，按终体积1:50～1:500接种于上述制好的LMH传代细胞中，并在36～37℃吸附30～60min后吸去病毒液，加入维持液，置于37～38℃、含5％CO2的环境下继续培养至细胞病变率达75％以上时收获细胞液；C)制苗毒液的繁殖：取步骤A)中已形成良好单层的细胞系培养瓶，弃去细胞生长液，接种上述步骤B)得到的细胞液，于37～38℃继续继续培养，当细胞病变达75％以上时收获毒液，于‑15℃以下保存；D)成品的制备：将步骤C)制备得到的毒液进行无菌检验、病毒含量测定，采用0.1％福尔马林灭活，在每1000ml灭活检验合格的鸡传染性法氏囊病病毒抗原液中加入0.5～2份免疫增强剂，混合均匀；按96:4的重量比加入灭菌后的吐温‑80，搅拌使之溶解后，加入白油90～100份、硬脂酸铝1～3份、Span‑804份，搅拌，高压灭菌，乳化，分装，即得。