[发明专利]一种近红外的电致化学发光免疫检测方法

摘要

本发明公开了一种近红外的电致化学发光免疫检测方法，包括以下步骤S1制备反应电极；S2绘制标准曲线；S3制备待测血清；S4取上述血清，按照S1步骤操作，制备待测的电极，并利用发光仪测定化学发光信号强度，根据S2步骤绘制的标准曲线即可计算血清中抗原的浓度。本发明提出的免疫检测方法合理利用电致化学发光技术，选取在近红外区具有识别功能的荧光探针对二抗进行标记，增强光强度信号的检出能力，抗原浓度的检测速度快，人为误差小，准确度和灵敏度高，操作简单，使用方便，适用范围广，可根据需要绘制不同抗原的化学发光信号强度标准曲线，且绘制的标准曲线可以在有效浓度范围内反复使用。

主权项

一种近红外的电致化学发光免疫检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：制备反应电极：向装有电极的反应器中加入抗原以及一抗，在常温下进行反应，待沉淀不在生成，用稀释液和吐温‑20进行清洗，再向反应器中加入含有荧光标记的二抗，继续反应，直至沉淀不再生成，再用稀释液和吐温‑20进行清洗，即制得反应电极；S2：绘制标准曲线：按照S1步骤以不同浓度的抗原为基体制备一系列反应电极，并利用发光仪对反应电极进行测试，记录化学发光信号强度，绘制不同浓度的抗原与化学发光信号强度的曲线，即得标准曲线；S3：制备待测血清：取待测血液置于35～45℃的水浴中预热10分钟，并将预热的血液快速转移至离心机中进行高速离心5～10分钟，即得待测血清；S4：取上述血清，按照S1步骤操作，制备待测的电极，并利用发光仪测定化学发光信号强度，根据S2步骤绘制的标准曲线即可计算血清中抗原的浓度。