[发明专利]一种米曲霉固态发酵制备富多肽蛋白饲料添加剂的方法

摘要

本发明公开了一种米曲霉固态发酵制备富多肽蛋白饲料添加剂的方法，属于饲料添加剂生物制备领域，具体步骤如下：将米曲霉孢子接种于菌种活化培养基上培养，待米曲霉孢子成熟后，结束培养，备用；将培养成熟后的米曲霉孢子用无菌生理盐水洗净后，制成单孢子菌悬液；将单孢子菌悬液接种到种子培养基上培养，即得米曲霉种子培养液；将米曲霉种子培养液接种到固态发酵培养基上发酵，发酵过程采用分阶段控制发酵，即得固体发酵物；将固体发酵物烘干至含水率低于10％，将烘干后的固体发酵物粉碎并过150～200目筛，即得富多肽干粉。本发明中制备的富多肽蛋白饲料添加剂基本不含抗营养因子且易吸收，并且对猪的生产有显著的促进作用。

主权项

一种米曲霉固态发酵制备富多肽蛋白饲料添加剂的方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)用接种环刮取米曲霉孢子接种于菌种活化培养基上，将菌种活化培养基置于28～32℃的生化培养箱中静止培养3～5天，待米曲霉孢子成熟后，结束培养，备用；(2)用含有0.01v/v％吐温80的0.75％无菌生理盐水将步骤(1)中培养成熟后的米曲霉孢子洗净后，放置于装有无菌玻璃珠和50mL无菌生理盐水的容器中，充分振荡20～30min，待米曲霉孢子充分打散后，即得单孢子菌悬液；(3)将步骤(2)中所制备的单孢子菌悬液以5～10％(v/v)的接种量接入装有30～50mL种子培养基的三角瓶中，所述三角瓶在转速为180～220r/min、温度为26～34℃的条件下，摇床培养2～4天，即得米曲霉种子培养液；(4)将步骤(3)中所制备的米曲霉种子培养液接入装有固态发酵培养基的三角瓶中发酵，发酵过程采用分阶段控制发酵，发酵初始至发酵48h，在此期间，摇晃三角瓶2～3次，并控制发酵的温度范围为28～32℃；发酵48h至96h，在此期间，摇晃三角瓶2～3次，并控制发酵的温度范围为30～35℃；发酵至96h时，向三角瓶中加入已灭过菌的补充蛋白悬浮液30～40mL并充分搅拌，搅拌均匀后，继续发酵至144h，同时控制发酵的温度范围为37～40℃；再次将发酵温度提高到45～50℃，继续发酵6～8h，即得固体发酵物；(5)将步骤(4)中的固体发酵物置于55～60℃的低温条件下烘干至含水率低于10％，将烘干后的固体发酵物粉碎并过150～200目筛，即得富多肽干粉。