[发明专利]全血中阿比特龙的定量检测方法

摘要

本发明公开了一种全血中阿比特龙的定量检测方法，以全血作为待测对象，依次进行以下步骤：在全血裂解液中加入乙酸乙酯振荡漩涡后离心，乙酸乙酯层氮气流吹干后用20％乙腈水溶液复溶后离心，吸取上清液Ⅰ；称取碱性硅藻土放入玻璃层析柱中，振动处理，然后加入上清液Ⅰ依次用纯水、20％甲醇水溶液、色谱甲醇洗脱，洗脱液氮气流吹干后用20％乙腈水溶液复溶后离心，吸取上清液Ⅱ进行高效液相色谱系统分析，得阿比特龙药物峰面积Y，代入公式Y＝27524X+1956.6，X为上清液Ⅱ的阿比特龙浓度；然后经换算，得待测全血中的阿比特龙浓度。

主权项

1.全血中阿比特龙的定量检测方法，其特征是：以全血作为待测对象，依次进行以下步骤：1)、吸取全血裂解液0.4mL于带盖容器中，加入乙酸乙酯3mL，振荡器漩涡2±0.2min，8000±500r/min高速离心5±0.5min，分别得位于上层的乙酸乙酯层、位于下层的残渣；在残渣中加入2mL乙酸乙酯重复上述振荡器漩涡、高速离心；合并两次离心所得的乙酸乙酯层；于45±1℃水浴中氮气流吹干，所得的干燥物用0.2mL的20％乙腈水溶液复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5min后，吸取上清液Ⅰ；2)、称取碱性硅藻土4g放入玻璃层析柱中，振动处理5±0.5min；3)、然后将步骤1)中的上清液Ⅰ全部加入步骤2)的玻璃层析柱中，先用5mL纯水洗脱，然后用20％甲醇水溶液5mL洗脱；最后用5mL色谱甲醇洗脱，收集色谱甲醇所对应的全部洗脱液，于45±1℃水浴中氮气流吹干，干燥物用0.2mL的20％乙腈水溶液复溶，漩涡混匀1±0.2min，18000±500r/min高速离心5±0.5min后，吸取上清液Ⅱ进行后续的高效液相色谱系统分析；4)、色谱柱采用Thermo Hypersil BDS C18色谱柱，3μm，250mm×4.6mm；流动相为乙腈‑水‑0.01M磷酸二氢钠＝60:5:35，v/v/v，流速1.0mL/min，柱温40℃，紫外检测波长254nm，进样量20μL；5)、以步骤4)所得的阿比特龙药物峰面积为Y，代入公式Y＝27524X+1956.6中，从而获得步骤3)所得的上清液Ⅱ中的阿比特龙浓度X，该X的单位为μg/ml；然后经换算，得待测全血中的阿比特龙浓度。