[发明专利]一种铁皮石斛基因组DNA的提取方法有效

专利信息
申请号: 201710147466.8 申请日: 2017-03-13
公开(公告)号: CN106636075B 公开(公告)日: 2019-09-13
发明(设计)人: 向红先 申请(专利权)人: 上海欧易生物医学科技有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 201114 上海市*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供了一种铁皮石斛基因组DNA的提取方法,该方法包括步骤:(1)粉碎铁皮石斛叶片;(2)制备铁皮石斛DNA提取试剂,所述提取试剂的配方为:100mM Tris‑Hcl、15mM EDTA、0.7M Nacl、3%(W/V)CATB、0.4%(W/V)抗坏血酸、0.1~0.3%(V/V)β‑巯基乙醇;上述组分的溶液为水;再加入氯仿和异戊醇混合溶液,其中氯仿与异戊醇的体积比为1:1;所述混合溶液的加入体积占提取试剂总体积的1/2;(3)将步骤(1)所得物加入步骤(2)所得提取试剂中,在0~4℃下静置20~40分钟,离心,然后用乙醇水溶液进行沉淀,即得DNA。本发明用时非常少,DNA纯度高。
搜索关键词: 一种 铁皮 石斛 基因组 dna 提取 方法
【主权项】:
1.一种铁皮石斛基因组DNA的提取方法,其特征在于,所述方法为以下步骤:(1)粉碎铁皮石斛叶片;(2)制备铁皮石斛DNA提取试剂,所述提取试剂的配方为:100mM Tris‑Hcl、15mM EDTA、0.7M Nacl、质量浓度为3%的CATB、质量浓度为0.4%的抗坏血酸、体积分数为0.1~0.3%的β‑巯基乙醇;上述组分的溶液为水;再加入氯仿和异戊醇混合溶液,其中氯仿与异戊醇的体积比为1:1;所述混合溶液的加入体积占提取试剂总体积的1/2;将步骤(1)所得物加入步骤(2)所得提取试剂中,在0~4℃下静置20~40分钟,离心,然后用乙醇水溶液进行沉淀,即得DNA;所述乙醇水溶液中,乙醇的体积分数为70~95%。
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