[发明专利]一种建立农杆菌介导香鳞毛蕨配子体遗传转化体系的方法有效
申请号: | 201710129897.1 | 申请日: | 2017-03-07 |
公开(公告)号: | CN108570478B | 公开(公告)日: | 2021-10-08 |
发明(设计)人: | 常缨;卜志刚;陈玲玲;陶文青;张常旭;王琪 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H9/00 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 邓宇 |
地址: | 150030 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一种建立农杆菌介导香鳞毛蕨配子体遗传转化体系的方法,属于香鳞毛蕨遗传转化技术领域。本发明所提供的方法为是以香鳞毛蕨配子体为受体,用植物双元表达载体转化农杆菌,将经过预培养的香鳞毛蕨配子体浸泡于转化后的农杆菌菌液中侵染,除菌后进行延迟培养,最后对目标基因进行检测,筛选后得到具有可遗传目标基因的香鳞毛蕨植株。该方法过程简单,操作方便,成本低廉,能在较短的时间内完成香鳞毛蕨遗传转化体系的建立,为今后进一步研究相关基因合成和调控的特性,转入抗性基因,创新蕨类植物的种质资源和遗传转化奠定基础。适用于香鳞毛蕨的遗传转化。 | ||
搜索关键词: | 一种 建立 杆菌 介导香鳞毛蕨 配子体 遗传 转化 体系 方法 | ||
【主权项】:
1.一种建立农杆菌介导香鳞毛蕨配子体遗传转化体系的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)预培养:将香鳞毛蕨配子体置于培养基上进行预培养;2)农杆菌菌液的制备:用植物双元表达载体转化农杆菌,然后将含有植物双元表达载体的农杆菌扩大培养后收集菌体,重悬后获得农杆菌菌液;3)农杆菌菌液的浸染;将步骤1)中经过预培养的香鳞毛蕨配子体浸泡于步骤2)获得的农杆菌菌液中进行侵染;4)除菌和延迟培养:除菌后进行延迟培养;5)检测筛选:最后对目标基因进行检测,筛选后得到具有可遗传目标基因的香鳞毛蕨植株。
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