[发明专利]应用于分子标记检测油菜杂交种纯度的DNA批量获取方法

摘要

本发明公开了一种应用于分子标记检测油菜杂交种纯度的DNA批量获取方法，本发明通过油菜杂交种深孔板内发芽的方法，成功实现种子发芽与DNA提取过程的无缝对接，不但显著提高了获取DNA的效率，同时也节约了人力和物力，压缩了实验成本。同时在此基础之上，本发明进一步简化碱裂解法提取DNA步骤，且配合高通量研磨器Fast&Fluid Management样品混匀仪的使用，实现了万份DNA样品提取10小时内完成的设想。该发明是快速批量低成本获取油菜子叶DNA样品的一整套集约化方案，通过本发明的应用可以大大提高获取应用于分子标记鉴定油菜杂交种纯度的DNA的效率。

主权项

一种应用于分子标记检测油菜杂交种纯度的DNA批量获取方法，其特征在于：包括以下步骤：1)首先配置琼脂糖凝胶并冷却，得到粘稠液态状的琼脂糖凝胶，然后向深孔板的每个小孔内加入粘稠液态状的琼脂糖凝胶；2)将待检测的油菜杂交种样品直接播种于含有琼脂糖凝胶的小孔中，并将深孔板置于培养箱中培养4～7天；3)待孔内油菜子叶展开时，每孔加入钢珠一颗，并随后向每孔中加入NaOH溶液；4)将深孔板水浴中加热，水浴完成后在其上加盖乳胶封口膜，对油菜杂交种子叶进行研磨；5)将研磨好的深孔板取出，打开封口膜，每孔内加入Tris‑HCl溶液，离心取上清即为样品DNA。