[发明专利]定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法有效
| 申请号： | 201710108142.3 | 申请日： | 2017-02-27 |
| 公开（公告）号： | CN106929421B | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 傅博强;陈敏璠;林婧;张玲;隋志伟;王晶 | 申请（专利权）人： | 中国计量科学研究院 |
| 主分类号： | C12N1/04 | 分类号： | C12N1/04 |
| 代理公司： | 北京慧诚智道知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11539 | 代理人： | 李楠 |
| 地址： | 100029 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： |
本发明实施例涉及一种定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法，所述制备方法包括：将目标菌株经营养琼脂接种及单菌落营养肉汤增菌后，获取对数生长期后期的微生物菌液；将微生物菌液进行稀释，并使用600nm波长的光吸收辅助控制菌浓度，获得定量浓度的均匀菌悬液；将保护剂与无菌水混合配成保护剂溶液；将菌悬液与保护剂溶液进行混合，得到混合液；其中，混合液的菌浓度为10 |
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| 搜索关键词： | 定量 保存 微生物 冷冻 干燥 小球 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法,其特征在于，所述制备方法包括：将目标菌株经营养琼脂接种及单菌落营养肉汤增菌后，获取对数生长期后期的微生物菌液；将所述微生物菌液进行稀释，并使用紫外光吸收辅助控制菌浓度，获得定量浓度的均匀菌悬液；将保护剂与无菌水混合配成保护剂溶液；其中，所述保护剂溶液中包括5g/ml～20g/ml的蛋白质、2g/ml～15g/ml的水溶性糖、0.5g/ml～10g/ml的谷氨酸钠和0g/ml～5g/ml的表面活性剂；将所述菌悬液与所述保护剂溶液进行混合，得到混合液；其中，所述混合液的菌浓度为102cfu/50μl～106cfu/50μl；取定量的所述混合溶液，利用液氮将所述混合溶液冷冻成球，然后进行预冻；其中，所述预冻时间不少于2小时，预冻温度为‑80℃～‑20℃；将所述预冻后的小球进行真空冷冻干燥，得到所述冷冻干燥小球。
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