[发明专利]一种药物组合物及其应用

摘要

本发明涉及肿瘤药物研究领域，尤其涉及一种药物组合物及其应用，所述组合物包括PD‑1抗体和非特异性扩增激活T细胞。本发明药物组合物包括PD‑1抗体和非特异性扩增激活T细胞，两种组分协同作用，能够明显抑制肾癌细胞的生长，并对肾癌细胞具有杀伤作用，且本发明药物组合物对肾癌有明显的治疗效果，按RESIST标准评价均达到PR(部分缓解)或接近CR(完全缓解)，有效率达100％，而副作用都十分微小，无3或4级不良反应发生。

主权项

PD‑1抗体和非特异性扩增激活T细胞在制备治疗肾癌的药物中的用途；其中所述PD‑1抗体的浓度为1‑10mg/kg病人体重；所述非特异性扩增激活T细胞的数量为3‑12×109个/次；其中所述非特异性扩增激活T细胞的制备方法包括如下步骤：(1)抽取病人外周血50mL，肝素钠抗凝，分装在两个50mL的离心管内800g、4℃离心15min；(2)离心后抽取上层血浆于50mL离心管中放于4℃冰箱中保存；(3)将离心管中的血细胞与生理盐水1:1稀释，缓慢加至淋巴细胞细胞分离液上层，800g、20℃离心17min； (4)离心后提取单个核细胞即白膜层置于50mL离心管内，加入生理盐水洗涤，300g、4℃离心8min，洗2遍；(5)细胞计数后将细胞进行CD4和CD8磁珠分选，并将获得的CD4+T细胞和CD8+T细胞按细胞数量比1:1进行混合，细胞接种在包被过RetroNectin60μL/瓶、CD3单抗15μL/瓶、PBS 10mL/瓶的培养瓶内，加入完全培养液50‑60mL，所述完全培养基为无血清培养液中加入IL‑2为1000IU/mL，IFN‑γ为1000IU/mL，庆大霉素为160IU/mL，IL‑1α为50‑150IU/mL，5％自体血浆，放入5％CO2培养箱中，37℃进行非特异性扩增激活T细胞的培养；(6)隔日显微镜下观察，根据细胞状态和数量适量补充完全培养基；(7)14d后非特异性扩增激活T细胞成熟，提前进行质控检测，合格后回收细胞，用生理盐水洗3遍，重悬后低速离心、弃上清，用适量含有 20％白蛋白的生理盐水重悬细胞，得到的细胞即为非特异性扩增激活T细胞。