[发明专利]一种鸡胚蛋性别快速鉴定方法

摘要

本发明公开了一种新的鸡胚蛋性别快速鉴定方法种蛋孵化至16、17或18日龄，通过1ml注射器于胚蛋尖端无菌获取尿囊液（10μL），取样后石蜡封口进行正常孵化；以取得的尿囊液为模板，设计CDH‑W特异性引物进行PCR扩增，通过凝胶电泳检测扩增产物并进行性别鉴定雄性扩增为双带（600bp和450bp），雌性为单带（450bp）；正常孵化出雏后统计孵化率和死亡率并与对照组进行生物统计学分析；对比性别鉴定的结果和出雏后仔鸡的剖检结果，进行关联分析，统计性别鉴定的准确率（准确率达99%，视为100%有效）。

主权项

一种鸡胚蛋性别快速鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括以下步骤：（1）16、17或18天胚龄胚蛋尿囊液采集胚蛋正常孵化至16、17或18日胚龄，使用1ml注射器通过胚蛋尖端位置取尿囊液；（2）CDH‑W特异引物性别鉴定根据CDH‑W在鸡NCBI数据库中CDS序列设计引物，引物序列为：上游Forward: 5’‑TGCAGAAGCAATATTACAAG‑3’；下游 Reward: 5’–AATTCATTATCATCTGGTGG‑3’； 以取得的尿囊液为模板，直接进行PCR扩增，通过凝胶电泳检测扩增产物，通过扩增产物大小对胚蛋的性别进行鉴定分别扩增ZW染色体不同片段，雄性扩增为双带，即600bp和450bp，雌性为单带，即450bp。