[发明专利]一种基于RPA技术的马尔堡病毒检测试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种基于RPA技术的马尔堡病毒检测试剂盒及其应用。通过实验证明本发明的马尔堡病毒的RPA引物和探针可有效扩增靶基因，特异性达100％，灵敏度为1×102copies/反应，病毒可达到与荧光定量PCR灵敏性相当的水平，与扎伊尔型埃博拉假病毒、登革病毒、肾综合症出血热病毒和新疆出血热病毒核酸均无交叉反应；且本发明的RPA等温扩增体系，反应快速，温度范围宽，在37‑42℃条件下均可实现靶基因的有效扩增，不仅可用于马尔堡病毒感染核酸的现场快速检测，也为病原体的现场筛查提供了可用的快速检测方法。同时对于防止马尔堡病毒在中国的感染传播及在疫区、出入境口岸的检验检疫也具有重要意义。

主权项

一种检测或辅助检测马尔堡病毒的成套引物，其由引物1、引物2和探针组成；所述引物1为如下a1)或a2)：a1)序列1所示的单链DNA分子；a2)将a1)限定的单链DNA分子进行一个或几个碱基的缺失、插入和/或改变得到的、与a1)限定的单链DNA分子具有相同功能的单链DNA分子；所述引物2为如下b1)或b2)：b1)序列2所示的单链DNA分子；b2)将b1)限定的单链DNA分子进行一个或几个碱基的缺失、插入和/或改变得到的、与b1)限定的单链DNA分子具有相同功能的单链DNA分子；所述探针依次由DNA片段甲、四氢呋喃和DNA片段乙组成；所述DNA片段甲为如下c1)或c2)：c1)序列3所示的单链DNA分子；c2)将c1)限定的单链DNA分子进行一个或几个碱基的缺失、插入和/或改变得到的、与c1)限定的单链DNA分子具有相同功能的单链DNA分子；所述DNA片段乙为如下d1)或d2)：d1)序列4所示的单链DNA分子；d2)将d1)限定的单链DNA分子进行一个或几个碱基的缺失、插入和/或改变得到的、与c1)限定的单链DNA分子具有相同功能的单链DNA分子。