[发明专利]一种球孢白僵菌的培养方法有效
申请号: | 201611270331.2 | 申请日: | 2016-12-30 |
公开(公告)号: | CN106497805B | 公开(公告)日: | 2019-07-16 |
发明(设计)人: | 青学刚;李文学;陈宝瑞;肖金树;刘刚;张友洪;周安莲;肖文福;黄盖群;刘俊凤;尹红;殷浩;王晓芬;陈义安;王皓 | 申请(专利权)人: | 四川省农业科学院蚕业研究所;四川省南充市桃园生物化学研究开发有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 成都市集智汇华知识产权代理事务所(普通合伙) 51237 | 代理人: | 李华;温黎娟 |
地址: | 637007*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开一种球孢白僵菌的培养方法,包括(1)一级斜面培养:将球孢白僵菌菌体接种于一级斜面培养基中,在24‑25℃培养5‑6天;(2)二级液体培养:将步骤(1)培养后得到的菌种接种至种子罐中,在24‑25℃培养24‑28h,(3)三级液体扩大培养:将步骤(2)培养后得到的菌种接种至发酵罐中,在25‑28℃培养28‑32h;(4)四级固体培养:将步骤(3)扩大培养后的菌种接种到固体培养基中,在22‑25℃下培养5‑6d。通过每个阶段中培养基组分的筛选和配比,同时配合培养的温度和湿度条件,可以缩短培养周期,提高球孢白僵菌分生孢子的质量和产量,提高分生孢子的活性。 | ||
搜索关键词: | 一种 球孢白僵菌 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种球孢白僵菌的培养方法,其特征在于:所述培养方法包括以下步骤:(1)一级斜面培养:将球孢白僵菌菌体接种于一级斜面培养基中,在24‑25℃培养5‑6天;(2)二级液体培养:将步骤(1)培养后得到的菌种接种至种子罐中,在24‑25℃培养24‑28h,所述种子罐中的液体培养基的组分按重量百分比计包括:PDA培养基,补充10‑20%蛋白胨、5‑10%尿素、5‑20%蔗糖、10‑15%麦麸、0.1‑0.5%磷酸二氢钾、0.01‑0.05%硫酸镁、0.01‑0.05%维生素B、0.01‑0.05%维生素C、0.01‑0.02%硫酸锌、0.01‑0.02%硫酸铜、0.05‑0.1%氯化铁、0.05‑0.1%氯化钙;(3)三级液体扩大培养:将步骤(2)培养后得到的菌种接种至发酵罐中,在25‑28℃培养28‑32h,所述发酵罐中的液体扩大培养基的组分按重量百分比计包括:PDA培养基,补充10‑20%蛋白胨、10‑20%蔗糖、10‑20%黄豆粉、0.1‑0.5%磷酸二氢钾、0.05‑0.1%硫酸镁、0.02‑0.05%维生素B、0.01‑0.02%维生素C、0.05‑0.15%氯化钙、0.2‑1.0%海藻酸钠;(4)四级固体培养:将步骤(3)扩大培养后的菌种接种到固体培养基中,在22‑25℃下培养5‑6d,所述固体培养基的组分按重量份数计包括:麦麸20‑30份、蚕蛹粉10‑20份、黄豆粉10‑20份、维生素B1‑3份、维生素C1‑2份、蔗糖2‑10份、米糠20‑40份;步骤(2)和步骤(3)中,所述维生素B为维生素B2、维生素B3、维生素B6的组合物,所述维生素B2、维生素B3、维生素B6的重量比为1:1‑2:1‑2。
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