[发明专利]一种用于细胞原位检测小分子化合物进入线粒体的方法有效
| 申请号： | 201611200144.7 | 申请日： | 2016-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN106770611B | 公开（公告）日： | 2019-01-29 |
| 发明（设计）人： | 张国海;彭艳;杨阳;李亮萍;曾淑兰 | 申请（专利权）人： | 广西师范大学 |
| 主分类号： | G01N27/62 | 分类号： | G01N27/62 |
| 代理公司： | 桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107 | 代理人： | 唐智芳 |
| 地址： | 541004 广*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于细胞原位检测小分子化合物进入线粒体的方法，具体为：选用适当的小分子化合物与细胞孵育，在不破坏细胞线粒体的条件下获取具有完整生理结构的线粒体，并收集胞浆；之后用小分子化合物与获取的线粒体进行孵育，将所得孵育小分子化合物后的线粒体及之前收集的胞浆在非变性条件下分别进行裂解以获得线粒体蛋白裂解液和胞浆蛋白裂解液，再结合质谱分析以实现在细胞原位水平上检测小分子化合物是否进入线粒体。采用该方法可以在细胞原位水平上检测小分子化合物是否进入线粒体，并可进一步检测小分子化合物进入线粒体的方式，可直接应用于先导药物的靶区验证或者用于以线粒体为效应器的先导药物的筛选，可靠性高，灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 小分子化合物 线粒体 细胞原位 检测 先导药物 裂解液 胞浆 孵育 非变性条件 细胞线粒体 线粒体蛋白 胞浆蛋白 结合质谱 生理结构 细胞孵育 灵敏度 效应器 靶区 裂解 筛选 验证 应用 分析 | ||
【主权项】：
1.一种用于细胞原位检测小分子化合物进入线粒体的方法，其特征在于：选用适当的小分子化合物与细胞孵育，在不破坏细胞线粒体的条件下获取具有完整生理结构的线粒体，并收集胞浆；之后用小分子化合物与获取的线粒体进行孵育，将所得孵育小分子化合物后的线粒体及之前收集的胞浆在非变性条件下分别进行裂解以获得线粒体蛋白裂解液和胞浆蛋白裂解液，再结合质谱分析以实现在细胞原位水平上检测小分子化合物是否进入线粒体。
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