[发明专利]一种透明质酸混纺纳米纤维固定酶的制备方法

摘要

本发明提供了一种透明质酸混纺纳米纤维固定酶的制备方法，与现有技术相比，本发明利用静电纺丝技术，使用生物相容性好且具有特殊保水性的透明质酸改性纳米纤维，并将此功能性纳米纤维应用于酶的固定，操作相对简便，而且混纺PMA‑AA@透明质酸纳米纤维形态稳定、孔隙率高、比表面积大，并含有大量的羧基。可应用于酶固定领域，显著提高酶的固载量和活性，具有显著的功能性。

主权项

1.一种透明质酸混纺纳米纤维固定酶的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：/n1)将PMA-PAA溶液与透明质酸钠溶液混合，震荡混匀后，即得到纺丝前驱体溶液；/n2)取纺丝前驱体溶液，采用静电纺丝技术进行纺丝，得到纳米纤维膜；/n3)室温下，将纳米纤维膜冲洗后，浸泡于盐酸溶液中，再冲洗去除表面盐酸，吹干后置于EDC/NHS溶液中反应活化，再冲洗，吹干后置于酶溶液中，震荡反应后，即得透明质酸混纺纳米纤维固定酶；/n步骤(1)中透明质酸钠溶液与PMA-PAA溶液的体积比为(0.5-3):5；/n步骤1)中，所述PMA-PAA溶液的制备方法为：/n将2mL丙烯酸和14mL丙烯酸甲酯溶于40mL N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入0.2～0.3g偶氮二异丙腈，充氮气10～12min后，放到60～80℃恒温水浴锅加热，反应15～24小时，即可得到黏稠、透明、均一的PMA-PAA溶液；/n步骤1)中，步所述透明质酸钠溶液的制备方法为：/n将DMF溶液和蒸馏水混合后，将透明质酸钠固体加入其中，溶解得到透明质酸钠溶液；其中，DMF溶液、蒸馏水和透明质酸钠固体的用量比为：3ml:3ml：8～48mg；/n步骤3)中所述酶溶液为南极假丝酵母酶溶液。/n